巨噬細(xì)胞相關(guān)基因在實(shí)驗(yàn)性升主動(dòng)脈瘤中表達(dá)的研究.pdf

1、目的: 主動(dòng)脈瘤的發(fā)病是一個(gè)多因素存在的復(fù)雜過(guò)程，是遺傳、生化、免疫、炎癥等多種因素相互影響，共同作用的結(jié)果。胸主動(dòng)脈瘤的病理特征主要是中膜降解退化，典型的病理改變通常是囊性中膜壞死，包括平滑肌細(xì)胞減少，彈性纖維斷裂和數(shù)量減少，還有蛋白水解酶聚集。巨噬細(xì)胞是炎性細(xì)胞家族中重要一員，炎癥細(xì)胞可以表達(dá)生長(zhǎng)因子，細(xì)胞活素類并能產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶，這些細(xì)胞因子及蛋白酶還可以誘導(dǎo)內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞遷移增殖和粥樣斑塊的形成。巨噬細(xì)胞相關(guān)基因可能

2、在升主動(dòng)脈瘤形成過(guò)程中有重要作用。本實(shí)驗(yàn)觀察實(shí)驗(yàn)性大鼠升主動(dòng)脈瘤中膠原、彈力纖維和平滑肌的形態(tài)學(xué)改變及巨噬細(xì)胞、MCP—1和iNOS在其中的表達(dá)及其意義。 方法: 幼年雌性Wistar大鼠，體重100-110g，30只(由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供)，分為動(dòng)脈瘤實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組兩組，每組15只。手術(shù)組，在無(wú)菌操作下開(kāi)胸，分離胸腺，游離升主動(dòng)脈。根據(jù)升主動(dòng)脈直徑，用穿有4號(hào)絲線的無(wú)菌塑料軟管(直徑1mm，長(zhǎng)度6—8mm)

3、，在主動(dòng)脈瓣上方0.5cm處，對(duì)升主動(dòng)脈進(jìn)行縮窄，縮窄環(huán)直徑與主動(dòng)脈外徑相一致，然后逐層關(guān)胸。對(duì)照組為正常大鼠。三個(gè)月后取材用HE染色方法觀察動(dòng)脈瘤組和對(duì)照組中膠原、彈力纖維和平滑肌的形態(tài)學(xué)改變。用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)動(dòng)脈瘤組和對(duì)照組中CD68、MCP—1和iNOS的表達(dá)，并進(jìn)行細(xì)胞定位。用RT-PCR方法檢測(cè)動(dòng)脈瘤組和對(duì)照組中MCP—1和iNOS的表達(dá)差異，用圖像分析軟件計(jì)算各條帶積分光密度值與β—actin積分光密度值的比值，用SP

4、SS13.0軟件對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果: HE染色顯示部分動(dòng)脈瘤內(nèi)有血栓形成，有的部位內(nèi)膜和中膜增生明顯，血栓和外膜層有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，而對(duì)照組的管壁結(jié)構(gòu)基本正常。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：CD68陽(yáng)性細(xì)胞、MCP—1和iNOS陽(yáng)性細(xì)胞均高于對(duì)照組。RT-PCR結(jié)果顯示升主動(dòng)脈瘤組織中的MCP—1和iNOS的mRNA表達(dá)明顯強(qiáng)于對(duì)照組(P＜0.05)。 結(jié)論: 實(shí)驗(yàn)性升主動(dòng)脈瘤中巨噬細(xì)胞、MCP—1和i