水稻紋枯病菌營養(yǎng)體親和性分化研究.pdf

1、水稻紋枯病是世界性的水稻病害之一，對水稻的為害日趨加劇，嚴重地制約著水稻的穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn)。種植抗病品種是防治植物病害經(jīng)濟有效的措施之一，而目前尚未有育成高抗水稻紋枯病的品種報道，其主要原因之一是水稻紋枯病菌具有強腐生性、寬寄主范圍和復(fù)雜的遺傳背景。為了解水稻紋枯病菌的遺傳變異情況，本研究在調(diào)查田間水稻紋枯病菌營養(yǎng)體親和性變化情況的基礎(chǔ)上，以強致病力菌株cx-2為出發(fā)菌株，分析影響該菌株營養(yǎng)體親和性分化的因子，利用AFLP分子標記分析了水稻紋

2、枯病菌營養(yǎng)體親和性分化的遺傳特性，并對營養(yǎng)體親和性分化菌株的不親和原因進行初步分析。主要研究結(jié)果如下:
　　1、水稻紋枯病菌在田間具有較高比例的營養(yǎng)體不親和現(xiàn)象。2012～2014年間對早稻田水稻移栽50 d后的田間水稻紋枯病菌的營養(yǎng)體親和性情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2012、2013和2014年分離菌株間的不親和比例分別為24.26％、39.22％、41.10％。
　　2、水稻紋枯病菌的營養(yǎng)體親和性分化與“稻-菌”互作和pH有關(guān)，但與

3、水稻品種的抗性、測試的殺菌劑和溫度無關(guān)。將菌株cx-2在30個不同水稻品種上進行5次連續(xù)的接種和再分離，從450株再分離菌株中鑒定出24株營養(yǎng)體親和性分化的菌株，24個菌株分別來自于其中的15個水稻品種，每個品種接種的3株植株中只從一株植株上分離到營養(yǎng)體親和性分化菌株;菌株cx-2連續(xù)接種在不同抗性水稻材料再分離后，鑒定出的營養(yǎng)體親和性分化的菌株比例與水稻品種抗性沒有對應(yīng)關(guān)系;在PDA培養(yǎng)條件下，菌株cx-2在甲基硫菌靈、苯醚甲環(huán)唑、丙

4、環(huán)唑等殺菌劑的EC50濃度下進行10次連續(xù)繼代培養(yǎng)，無論是單一藥劑還是兩種藥劑交替脅迫條件下均未分離到營養(yǎng)體親和性分化菌株;菌株cx-2在不同pH的PDA平板上進行繼代培養(yǎng)，在酸性和中性條件下未分離到營養(yǎng)體親和性分化菌株，該菌株在堿性條件(pH10，pH11)下容易發(fā)生營養(yǎng)體親和性分化。菌株cx-2在5、10、15、20、25、30、35和40℃的供試溫度條件下，經(jīng)PDA平板連續(xù)繼代培養(yǎng)10次的菌株中均未檢測到營養(yǎng)體親和性分化菌株。

5、r>　　營養(yǎng)成分也可影響水稻紋枯病菌菌株cx-2營養(yǎng)體親和性分化，在供試培養(yǎng)基中NA和DP培養(yǎng)基能誘導(dǎo)菌株cx-2營養(yǎng)體親和性分化，其營養(yǎng)成分中的蛋白胨是引起水稻紋枯病菌營養(yǎng)體親和性分化的主要因素。結(jié)合該菌在堿性條件下容易發(fā)生營養(yǎng)體親和性分化的特性，制備的PA培養(yǎng)基在pH10條件下能快速誘導(dǎo)水稻紋枯病菌株cx-2產(chǎn)生營養(yǎng)體親和性分化。
　　3、營養(yǎng)體親和性分化菌株與原始菌株cx-2的致病力和AFLP指紋圖譜上均沒有差異，說明該病原

6、菌營養(yǎng)體親和性分化與致病力分化及AFLP指紋圖譜的改變沒有關(guān)系。
　　4、營養(yǎng)體親和性分化菌株與原始菌株cx-2對峙培養(yǎng)時在顯微狀態(tài)下觀察到兩菌株交接處有大量菌絲細胞融合后死亡的現(xiàn)象，而親和性菌株在菌落交接處融合后能繼續(xù)生長;不親和性菌株對峙培養(yǎng)產(chǎn)生隔離帶的原因與胞外分泌物無關(guān);營養(yǎng)體親和分化菌株與原始菌株cx-2互作后沒有檢查到細胞程序性死亡的DANladder。
　　營養(yǎng)體親和性分化菌株與原始菌株的蛋白質(zhì)指紋圖譜存在差異