糖化血紅蛋白對內(nèi)皮細(xì)胞分泌eNOS、NO、t-PA、PAI-1、E-selectin、sICAM-1的作用.pdf

1、目的： 觀察糖化血紅蛋白(HbA<,1>C)對血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌eNOS、NO、t-PA、PAI-1、sE-選擇素及slCAM-1的影響，探討HbA<,1C>在動(dòng)脈粥樣硬化形成過程中所起的作用。 方法： 1.培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(ECV304)。 2.ECV304細(xì)胞分別與含2％新生小牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基(空白組)、血紅蛋白組(5.3％血紅蛋白)、低濃度HbA<,1>C組(5.3％糖化血紅蛋白)

2、及高濃度HbA<,1>C組(9.2％糖化血紅蛋白)孵育24h(分作6孔)。 3.各組均用化學(xué)比色法測定培養(yǎng)液上清e(cuò)NOS活力；用硝酸還原酶法測定培養(yǎng)液上清NO的含量；用發(fā)色底物法測定t-PA、PAI-1的活性；采用雙抗體夾心ABC-ELISA法，測定sE-選擇素和slCAM-1的濃度值。 結(jié)果： 1.低濃度HbA<,1>C組NO、eNOS表達(dá)與血紅蛋白組相似，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；高濃度HbA<,1>C組NO、eNOS表

3、達(dá)明顯低于其他各組。 2.空白組、血紅蛋白組、低濃度HbA<,1>C組三組PAI-1生成量相似，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；高濃度HbA<,1>C組PAI-1生成量明顯高于其他各組。低濃度HbA<,I>C組t-PA生成量顯著高于與其他各組；高濃度HbA<,1>C組t-PA生成量明顯低于空白組及血紅蛋白組，更低于低濃度HbA<,1>C組。 3.血紅蛋白組、低濃度糖化血紅蛋白組slCAM-1表達(dá)高于空白組；高濃度糖化血紅蛋白組E-選擇素、

4、sICAM-1表達(dá)明顯高于其他各組。 結(jié)論： 1.HbA<,1C>對臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分泌NO及NOS的影響呈濃度反向依賴性，高濃度HbA<,1C>組NO、NOS表達(dá)明顯受抑。 2.HbA<,1C>對臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生成t-PA、PAI-1的影響均顯示出濃度依賴性，但t-PA活性呈濃度反向依賴，PAI-1呈濃度正向依賴。 3．HbA<,1C>對臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生成E-選擇素、sICAM-1的影響均表現(xiàn)為濃度正向