人子宮內膜環(huán)氧化酶-2、表皮生長因子與多囊卵巢綜合征患者早期流產(chǎn)的關系.pdf

1、目的:多囊卵巢綜合征是一種以月經(jīng)稀發(fā)、卵泡發(fā)育障礙、胰島素抵抗和高雄激素為其特征性改變的病因復雜的神經(jīng)內分泌疾病，其在育齡婦女的發(fā)生率約為5％-10％。由于患者異常的內分泌改變，常引起月經(jīng)紊亂、肥胖、多毛及不孕等，并且在妊娠以后容易發(fā)生自然流產(chǎn)。有報道，PCOS患者在妊娠早期尤其是最初3個月內流產(chǎn)率高達25％-73％。早期流產(chǎn)是人類生殖中最常見的并發(fā)癥，有報道在習慣性流產(chǎn)患者中PCOS的發(fā)生率高達58％。近年的研究結果提示，子宮內膜發(fā)育

2、障礙和胚胎容受性障礙可能導致PCOS患者不良的妊娠結局和弱的生育能力。
　　 環(huán)氧化酶屬于膜結構蛋白，是前列腺素合成過程中的一種重要限速酶，哺乳動物體內有COX-1、COX-2、COX-3三種同工酶。COX-2在血管內皮細胞、神經(jīng)細胞、巨噬細胞、纖維母細胞和軟骨細胞等均有表達，其位于核內、內質網(wǎng)，在細胞外網(wǎng)狀結構、核膜和細胞核邊緣并發(fā)生相應作用，主要參與疼痛信號的傳遞、炎癥過程及腫瘤的發(fā)生發(fā)展。在人類胚胎著床期間，COX-1、C

3、OX-2均有表達，COX-1主要在腺上皮和腔上皮表達，COX-2主要在血管周圍細胞和腺上皮表達。用免疫組化和組織超微定位方法研究2-細胞期、4～8-細胞期、桑椹胚等不同發(fā)育階段的胚胎，所有胚胎都顯示COX呈陽性表現(xiàn)，其中2-細胞期表達最強。COX與胚泡著床關系密切，它受雌激素、孕激素等因素的調節(jié)，通過膜受體和核受體途徑參與著床，在著床期呈高水平有規(guī)律表達。COX主要作用于子宮內膜，通過調節(jié)子宮內膜的腔上皮分化、問質蛻膜化、血管通透性等諸

4、多方面而影響著床，其在著床過程中起著不可替代的重要作用。
　　 表皮生長因子是1962年首次從小鼠頜下腺中分離出來的。它含有53個氨基酸，為單鏈多肽類生長因子，與表皮生長因子受體結合，通過表皮生長因子受體自身磷酸化而發(fā)揮其生物學作用。表皮生長因子具有促有絲分裂和非促有絲分裂得兩重性，能刺激內中外胚層的細胞的增殖和分化，促進組織的生長，發(fā)育，成熟。表皮生長因子在卵泡發(fā)育，卵母細胞成熟、胚胎早期、胚胎著床期、子宮內膜蛻膜化的過程中均

5、起重要作用。并且表皮生長因子對女性的內分泌腺有調節(jié)作用，可直接影響多種內分泌腺的分泌功能，可促進促性腺激素、促腎上腺皮質激素、絨促性素、泌乳素、促甲狀腺激素等的分泌。
　　 環(huán)氧化酶-2和表皮生長因子是與子宮內膜容受性相關的重要因子，本題研究子宮內膜環(huán)氧化酶-2、表皮生長因子在發(fā)生早期流產(chǎn)的多囊卵巢綜合征患者的子宮內膜的表達情況，初步探討子宮內膜中環(huán)氧化酶-2、表皮生長因子與多囊卵巢綜合征患者早期流產(chǎn)的關系。
　　 方法

6、:實驗分三組:有自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者29例，無自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者30例，同期初診的輸卵管性不孕患者30例作為對照組。觀察組患者于月經(jīng)干凈3-7天時或閉經(jīng)期或淋漓出血時行診斷性刮宮取得子宮內膜，對照組患者于月經(jīng)干凈3天至排卵前在宮腔鏡下取得子宮內膜標本，4％中性甲醛溶液固定，石蠟包埋，采用免疫組織化學法測定COX-2及EGF的表達。檢測項目及檢測方法本實驗所用COX-2鼠抗人單克隆抗體和EGF鼠抗人單克隆抗體試劑盒，

7、實驗步驟按試劑盒說明進行，以微波枸櫞酸鹽進行抗原修復，DAB顯色，同時用PBS代替一抗作為染色的陰性對照。采用半定量積分法，隨機選擇10個具有代表意義的高倍視野，每個視野計數(shù)100個細胞中的陽性細胞數(shù)，即將陽性細胞的百分率及陽性細胞著色強度分別進行分級記分，然后根據(jù)兩項之和確定其陽性強度。陽性細胞的百分率＜5％為0分;5％～25％為1分;26％～50％為2分;56％～75％為3分;＞75為4分;陽性細胞的著色強度為無色或著色很弱，0分;

8、淡棕黃色，1分;棕黃色，2分;深棕黃色或胞漿內出現(xiàn)深棕色斑塊，3分。陽性細胞的百分率和陽性細胞著色強度相加，0分為陰性(-)，1～3分為弱陽性(+)，4～7分為強陽性（++～+++）。
　　 結果:
　　 1、有自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者29例，子宮內膜環(huán)氧化酶-2陽性者7例，陽性率24.13％，對照組患者30例，子宮內膜環(huán)氧化酶-2陽性者17例，陽性率56.67％，多囊卵巢綜合癥患者組的子宮內膜環(huán)氧化酶-2陽性表達

9、率明顯低于正常子宮內膜組中環(huán)氧化酶-2的表達，兩組間差異均有顯著性;
　　 2、有自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者29例，子宮內膜表皮生長因子陽性者12例，陽性率41.37％，對照組患者30例，子宮內膜表皮生長因子陽性者21例，陽性率70％，多囊卵巢綜合癥患者組的子宮內膜表皮生長因子陽性表達率也明顯低于正常子宮內膜組中表皮生長因子的表達;
　　 3、有自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者29例，子宮內膜環(huán)氧化酶-2陽性者7例，陽

10、性率24.13％，無自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者30例，子宮內膜環(huán)氧化酶-2陽性者9例，陽性率30.00％，有自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者與無自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者兩組間子宮內膜環(huán)氧化酶-2的表達無差異性;
　　 4、有自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者30例，子宮內膜表皮生長因子陽性者12例，陽性率41.73％，無自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者30例，子宮內膜表皮生長因子陽性者12例，陽性率40.00％，而有自然流產(chǎn)史

11、的多囊卵巢綜合征患者與無自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者兩組間子宮內膜表皮生長因子的表達無差異性。
　　 結論:環(huán)氧化酶-2、表皮生長因子在多囊卵巢綜合癥患者及正常對照組的子宮內膜都有表達，提示這兩種因子與子宮內膜容受性相關。環(huán)氧化酶-2、表皮生長因子在子宮內膜組織的表達明顯低于正常對照組，提示多囊卵巢綜合癥患者子宮內膜內膜環(huán)氧化酶-2、表皮生長因子的低表達與高流產(chǎn)率相關。有自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜合征患者與無自然流產(chǎn)史的多囊卵巢綜