血紅素氧合酶-1基因調(diào)控對(duì)非相當(dāng)于精性脂肪性肝炎-肝纖維化防治作用的研究.pdf

1、非酒精性脂肪性肝?。╪on-alcoholic fatty liver disease， NAFLD）是具有與酒精性脂肪性肝病相同病理改變而無(wú)過(guò)量飲酒史的臨床病理綜合癥。NAFLD疾病譜包括單純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis， NASH)、非酒精性脂肪性肝纖維化和NASH相關(guān)肝硬化，其中非酒精性脂肪性肝炎/肝纖維化是該病進(jìn)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)和發(fā)展為肝硬化的必經(jīng)階段。迄今，關(guān)于該病發(fā)生及

2、進(jìn)展的機(jī)制尚不十分清楚，亦缺乏有效的治療措施。
　　 血紅素氧合酶-1（heme oxygenase-1， HO-1）是一種抗氧化酶，主要功能是催化血紅素產(chǎn)生等摩爾的膽綠素/膽紅素、一氧化碳和游離鐵，具有抗氧化、抗炎、抑制細(xì)胞增生、改善微循環(huán)等生物學(xué)作用，但其在非酒精性脂肪性肝炎/肝纖維化中的作用及作用機(jī)制尚不清楚。
　　 本課題采用高脂、膽堿-蛋氨酸缺乏(high fat， methionine-choline def

3、icient diet， MCD)飲食建立非酒精性脂肪性肝炎/肝纖維化動(dòng)物模型，觀察HO-1表達(dá)與肝脂肪變、炎癥及纖維化發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，并探討HO-1靶向調(diào)控的治療作用及作用機(jī)制，為該病治療策略的選擇及藥物的開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。
　　 第一部分、非酒精性脂肪性肝炎/肝纖維化動(dòng)物模型的建立及HO-1表達(dá)的研究
　　 目的：探討HO-1在非酒精性脂肪性肝炎/肝纖維化發(fā)病過(guò)程中的表達(dá)、作用及作用機(jī)制。
　　 方法：采用M

4、CD飲食喂養(yǎng)健康雄性C57BL/6J小鼠4周、8周，分別建立非酒精性脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝纖維化模型，以膽堿-蛋氨酸充足飲食設(shè)立對(duì)照組。酶法測(cè)定血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase， ALT)及天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase， AST)水平；HE、蘇丹Ⅳ和Masson染色觀察肝脂肪變、炎癥活動(dòng)和纖維化程度，肝脂肪變、炎癥及纖維化程度的評(píng)估依據(jù)2010年中

5、華醫(yī)學(xué)會(huì)脂肪肝學(xué)組《非酒精性脂肪性肝病診療指南》及美國(guó)NASH臨床研究協(xié)會(huì)病理工作組2005年制定的NAFLD組織學(xué)評(píng)分(NAFLD activity score， NAS)系統(tǒng)；以實(shí)時(shí)定量PCR、Western blot和免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)HO-1 mRNA及蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.實(shí)驗(yàn)小鼠血清ALT、AST水平：
　　 MCD飲食喂養(yǎng)4周及8周后，模型組小鼠的血清ALT(267.03±31.50

6、U/L、695.87±73.96U/L)和AST(517.43±20.84U/L、986.93±23.69U/L)水平較對(duì)照組ALT（31.43±4.76U/L、32.43±13.54U/L）和AST（34.73±6.16U/L、33.20±14.00U/L）水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.001。
　　 2.實(shí)驗(yàn)小鼠肝臟解剖學(xué)及組織病理學(xué)變化：
　　 2.1 大體觀察
　　 對(duì)照組小鼠肝臟大小正常、被膜

7、光滑，為暗紅色，明亮有光澤；模型組小鼠4周時(shí)即出現(xiàn)肝臟體積減小，顏色變黃，有油膩感；8周時(shí)肝臟減小明顯、黃色油膩感更加明顯、無(wú)光澤，邊緣圓鈍，與周?chē)M織有粘連。
　　 2.2 光鏡下觀察
　　 HE及Masson染色：對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)基本正常；MCD飲食4周，肝細(xì)胞彌漫性水樣變，伴有大泡性為主的肝細(xì)胞脂肪變，以腺泡3帶為著，肝竇間隙變窄，小葉內(nèi)可見(jiàn)點(diǎn)狀或灶狀肝細(xì)胞壞死，伴有淋巴細(xì)胞和少量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)（NAS評(píng)分6～7S

8、1）；MCD飲食8周，小鼠肝脂肪變、肝細(xì)胞壞死、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)加重，竇周細(xì)胞增生活躍，匯管區(qū)擴(kuò)大，纖維組織增生，可見(jiàn)纖維間隔形成(NAS評(píng)分7～8S1～2)。蘇丹Ⅳ染色：對(duì)照組肝細(xì)胞胞漿偶見(jiàn)脂肪小滴；模型組，MCD飲食4周肝細(xì)胞脂肪變明顯，胞漿充滿鮮紅色脂滴，8周較4周肝細(xì)胞脂肪變加重。
　　 3.實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織HO-1 mRNA及蛋白表達(dá)及其在肝損傷中的作用：
　　 3.1 HO-1 mRNA表達(dá)實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)

9、小鼠喂養(yǎng)4周和8周，對(duì)照組肝組織HO-1 mRNA少量表達(dá)（0.86±0.12和0.79±0.20）：模型組4周和8周HO-1 mRNA表達(dá)（5.49±1.26和4.66±0.67）均較對(duì)照組顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01。
　　 3.2 HO-1蛋白表達(dá)Western blot檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織HO-1蛋白表達(dá)與mRNA表達(dá)呈一致趨勢(shì)，模型組4周和8周（0.66±0.05、0.53±0.08）較對(duì)照組（0.22±

10、0.03、0.26±0.09）顯著增強(qiáng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01；肝組織切片免疫組織化學(xué)染色顯示，造模4周和8周，對(duì)照組肝組織中偶見(jiàn)HO-1在Kupffer細(xì)胞中表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞百分比分別為：0.09±0.01和0.04±0.00；模型組為1.13±0.18和0.91±0.15，主要表達(dá)在Kupffer細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞和肝細(xì)胞的胞漿中，兩組間差異顯著，P＜0.01。
　　 結(jié)論：
　　 1.高脂、膽堿-蛋氨酸缺乏飲

11、食可誘導(dǎo)與人類(lèi)非酒精性脂肪性肝炎/肝纖維化比擬性良好的動(dòng)物模型，為發(fā)病機(jī)制和治療藥物的研究提供了良好的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?br>　　 2.非酒精性脂肪性肝炎/肝纖維化組織中HO-1 mRNA及蛋白表達(dá)明顯上調(diào)，可能為一種對(duì)氧化性肝損傷的反應(yīng)性保護(hù)作用，表明HO-1參與非酒精性脂肪性肝炎/肝纖維化的發(fā)病及進(jìn)展。
　　 第二部分、HO-1基因調(diào)控對(duì)非酒精性脂肪性肝炎中肝細(xì)胞凋亡的影響
　　 目的：探討HO-1對(duì)非酒精性脂肪性肝炎發(fā)

12、病及進(jìn)展中肝細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制。
　　 方法：采用MCD飲食喂養(yǎng)C57BL/6J小鼠4周，建立NASH模型。分別應(yīng)用HO-1抑制劑鋅原卟啉(ZnPP-IX)、激動(dòng)劑血晶素(hemin)及/或腺病毒載體HO-1基因?qū)?Ad-HO-1)進(jìn)行干預(yù)實(shí)驗(yàn)，設(shè)立對(duì)照組及空載體Ad-GFP導(dǎo)入組。酶法測(cè)定血清ALT和AST水平；光鏡下觀察肝脂肪變及炎癥程度：硫代巴比妥酸法測(cè)定肝組織丙二醛(malondialdehyde， MDA)含量；脫

13、氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal deoxynucleotide transferase mediated dUTP nick end labeling method, TUNEL)檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡的形態(tài)特征和分布，并計(jì)算細(xì)胞凋亡指數(shù)；免疫組織化學(xué)染色、實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法檢測(cè)HO-1的分布及表達(dá)；實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法檢測(cè)凋亡相關(guān)因子mRNA及蛋白的表達(dá)。
　　

14、 結(jié)果：
　　 1.實(shí)驗(yàn)小鼠血清ALT及AST水平：
　　 對(duì)照組、模型組及Ad-GFP導(dǎo)入組ALT和AST依次為：31.43±4.76U/L和34.73±6.16U/L、267.03±31.50U/L和268.27±30.44U/L、517.43±20.84U/L和509.73±16.57U/L，模型組和Ad-GFP導(dǎo)入組顯著高于對(duì)照組；HO-1激動(dòng)劑血晶素組為109.16±16.49U/L和235.38±14.37

15、U/L，顯著低于模型組；HO-1抑制劑鋅原卟啉組ALT和AST為499.74±14.09U/L和75.12±63.89U/L，顯著高于模型組：HO-1腺病毒Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合組血清ALT(110.12±9.12U/L、103.24±6.07U/L)和AST（211.34±19.86U/L、205.86±13.37U/L）均較Ad-GFP導(dǎo)入組顯著降低；血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組及血晶素與Ad-HO-1聯(lián)

16、合應(yīng)用組三者間血清ALT、AST水平無(wú)明顯差異。
　　 2.實(shí)驗(yàn)小鼠組織病理學(xué)變化：
　　 肝組織切片HE染色顯示，模型組、Ad-GFP導(dǎo)入組可見(jiàn)中、重度脂肪變及明顯的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（NAS評(píng)分6～7S1），肝損傷表現(xiàn)同第一部分。血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組、血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組小鼠肝損傷較模型組明顯減輕，肝細(xì)胞輕度水樣變，脂肪變輕微，未見(jiàn)明顯肝細(xì)胞壞死及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)(NAS評(píng)分2～3S0)，血晶素和Ad-H

17、O-1聯(lián)合應(yīng)用組未見(jiàn)明顯的協(xié)同作用；鋅原卟啉干預(yù)組較MCD模型組肝細(xì)胞重度脂肪變性、炎細(xì)胞浸潤(rùn)更加明顯(NAS評(píng)分7～8S1～2)。
　　 3.實(shí)驗(yàn)小鼠肝細(xì)胞的凋亡情況：
　　 TUNEL分析結(jié)果顯示，對(duì)照組肝細(xì)胞凋亡偶見(jiàn)(0.43±0.25％)；與對(duì)照組相比，MCD模型組及Ad-GFP導(dǎo)入組TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（3.59±1.02％、4.17±1.04％）明顯增多；與模型組比較，血晶素組TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（1.63±

18、0.78％）明顯減少，而鋅原卟啉組TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（6.38±0.80％）顯著增多，與肝組織損傷程度相一致；Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(1.53±0.45％、1.33±0.53％)較Ad-GFP導(dǎo)入組明顯減少，但血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組三者間TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)無(wú)明顯差異。
　　 4.實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織中MDA含量的變化：
　　 MC

19、D模型組及Ad-GFP導(dǎo)入組肝組織MDA含量（5.09±1.01nmol/mg、4.95±0.75nmol/mg）較對(duì)照組（1.68±0.32nmol/mg）明顯升高；與模型組比較，血晶素組肝組織MDA含量（3.50±0.67nmol/mg）明顯降低，而鋅原卟啉組MDA含量（6.44±0.65nmol/mg）升高顯著；Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組MDA含量（3.69±0.78nmol/mg、3.13±0.66n

20、mol/mg）較Ad-GFP導(dǎo)入組明顯降低，但血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組三者間MDA含量無(wú)明顯差異。
　　 5.實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織中HO-1表達(dá)情況：
　　 實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法檢測(cè)顯示HO-1 mRNA及蛋白的表達(dá)呈一致趨勢(shì)，MCD模型組及Ad-GFP導(dǎo)入組顯著高于對(duì)照組，P＜0.01，P＜0.001；血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組及血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用

21、組顯著高于模型組，P＜0.01，P＜0.001;鋅原卟啉組HO-1表達(dá)明顯減少。肝組織切片免疫組化染色結(jié)果顯示，HO-1表達(dá)與上述結(jié)果呈一致趨勢(shì)，主要表達(dá)于Kupffer細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞和肝細(xì)胞漿內(nèi)。
　　 6.HO-1基因調(diào)控對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織CYP2E1、Fas、FasL、caspase-3、caspase-9、Cyt-c、Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白表達(dá)的影響：
　　 與對(duì)照組比較，MCD模型組和Ad-GFP導(dǎo)

22、入組肝組織CYP2E1、Fas、FasL、caspase-3、caspase-9、Cyt-c和Bax mRNA及蛋白表達(dá)明顯升高；與模型組對(duì)比，血晶素組肝組織CYP2E1、Fas、FasL、caspase-3、caspase-9、Cyt-c和Bax mRNA及蛋白表達(dá)顯著下降，而鋅原卟啉組CYP2E1、Fas、FasL、caspase-3、caspase-9、Cyt-c和Bax mRNA及蛋白表達(dá)進(jìn)一步升高；與Ad-GFP導(dǎo)入組比較，A

23、d-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組CYP2E1、Fas、FasL、caspase-3、caspase-9、Cyt-c和Bax mRNA及蛋白表達(dá)顯著下降；Bcl-2 mRNA及蛋白在各組小鼠肝組織中的表達(dá)與上述因子的表達(dá)趨勢(shì)相反。但血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組及血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組三者間CYP2E1、Fas、FasL、caspase-3、caspase-9、Cyt-c、Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白表

24、達(dá)無(wú)明顯差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.在MCD飲食誘導(dǎo)的NASH模型中，氧化應(yīng)激可能是肝細(xì)胞發(fā)生凋亡的始動(dòng)因素。
　　 2.血晶素和Ad-HO-1基因?qū)肷险{(diào)HO-1表達(dá)，阻止或減輕氧化應(yīng)激導(dǎo)致的肝損傷。
　　 3.HO-1基因表達(dá)上調(diào)可通過(guò)抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)和調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)基因的表達(dá)阻止肝細(xì)胞凋亡的發(fā)生，從而減緩或阻止非酒精性脂肪性肝炎的進(jìn)展。
　　 第三部分、HO-1基因調(diào)控對(duì)非酒精性脂肪性肝纖

25、維化小鼠纖維化相關(guān)因子表達(dá)的影響
　　 目的：探討HO-1基因調(diào)控在非酒精性脂肪性肝纖維化進(jìn)展中的作用及其機(jī)制。
　　 方法：采用MCD飲食喂養(yǎng)C57BL/6J小鼠8周，建立非酒精性脂肪性肝纖維化模型，實(shí)驗(yàn)分組及干預(yù)方式同第二部分。酶法測(cè)定小鼠血清ALT和AST水平；光鏡下觀察肝脂肪變、炎癥活動(dòng)及纖維化程度；羥脯氨酸分析法測(cè)定肝臟膠原含量；硫代巴比妥酸法測(cè)定肝組織MDA含量；RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定腫瘤壞死因子α

26、(tumor necrosis factor-alpha， TNF-α)、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6， IL-6）和細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)抑制因子-1（suppressor of cytokine signaling-1， SOCS-1）mRNA表達(dá)；實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法檢測(cè)HO-1、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth muscle actin， a-SMA)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transformi

27、ng growth factor beta1， TGF-β1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metallopeptidase2)、基質(zhì)金屬蛋白-9（matrix metallopeptidase-9）mRNA和蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.實(shí)驗(yàn)小鼠血清ALT及AST水平：
　　 對(duì)照組、模型組和Ad-GFP導(dǎo)入組ALT和AST依次為：32.43±13.54U/L和33.20±24.00U/L、695.

28、87±73.96U/L和986.93±23.70U/L、643.93±45.01U/L和918.90±127.74U/L，模型組和Ad-GFP導(dǎo)入組顯著高于對(duì)照組；HO-1激動(dòng)劑血晶素組ALT和AST為234.28±35.36U/L和308.80±29.20U/L，顯著低于模型組；HO-1抑制劑鋅原卟啉組ALT和AST為983.50±28.72U/L和1122.52±64.54U/L，顯著高于模型組；與Ad-GFP導(dǎo)入組相比，HO-1腺

29、病毒Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組血清ALT(229.96±38.86U/L、219.80±26.06U/L)、AST(291.00±20.53U/L、267.07±36.42U/L)均較Ad-GFP導(dǎo)入組顯著降低；血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組及血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組三者間血清ALT、AST水平無(wú)明顯差異。
　　 2.實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織病理學(xué)變化：
　　 肝組織切片HE及Masson染色顯

30、示，模型組、Ad-GFP導(dǎo)入組肝細(xì)胞脂變、點(diǎn)灶狀壞死明顯，竇周細(xì)胞增生活躍，可見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，匯管區(qū)擴(kuò)大，纖維組織增生，纖維間隔形成(NAS評(píng)分7～8S1～2)；血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組、血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組小鼠肝組織病變較模型組明顯減輕，少數(shù)肝細(xì)胞脂肪變，個(gè)別氣球樣變，偶見(jiàn)小葉內(nèi)點(diǎn)、灶狀壞死，輕度纖維組織增生，匯管區(qū)擴(kuò)大不明顯(NAS評(píng)分3～4S0～1)，血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組未見(jiàn)明顯的協(xié)同作用；鋅原卟啉組肝

31、細(xì)胞重度脂肪變性，炎細(xì)胞浸潤(rùn)、竇周纖維化明顯(NAS評(píng)分7～8S2～3)。
　　 3.HO-1調(diào)控對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織中羥脯氨酸含量的影響：
　　 造模8周，MCD模型組和Ad-GFP導(dǎo)入組肝組織羥脯氨酸含量(196.67±21.93μg/mg、316.67±44.01μg/mg）均顯著高于對(duì)照組（196.67±21.93μg/mg）；與模型組比較，血晶素組肝組織羥脯氨酸含量（263.00±14.73μg/mg）明顯降低，而

32、鋅原卟啉組肝組織羥脯氨酸含量（446.00±24.42μg/mg）顯著增高；與Ad-GFP導(dǎo)入組對(duì)比，Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組肝組織羥脯氨酸含量亦明顯降低（271.67±13.32μg/mg、258.67±20.21μg/mg）；血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組及血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組三者間肝組織羥脯氨酸含量無(wú)明顯差異。
　　 4.HO-1調(diào)控對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織中MDA含量的影響：
　　

33、 造模8周，與對(duì)照組（1.49±0.40nmol/mg）比較，MCD模型組及Ad-GFP導(dǎo)入組肝組織MDA含量（4.81±0.98nmol/mg、4.63±0.92nmol/mg）明顯升高；與模型組相比，血晶素組肝組織MDA含量（3.57±0.63nmol/mg）明顯降低，而鋅原卟啉組MDA含量（6.29±0.69nmol/mg）升高顯著；與Ad-GFP導(dǎo)入組相比，Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組MDA含量（3.

34、43±0.49nmol/mg、3.00±0.40nmol/mg）亦明顯降低，但血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組三者間MDA含量無(wú)明顯差異。
　　 5.實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織HO-1 mRNA及蛋白的表達(dá)：
　　 各組實(shí)驗(yàn)小鼠HO-1表達(dá)趨勢(shì)同第二部分。
　　 6.HO-1調(diào)控對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織炎癥因子TNF-α、IL-6和SOCS-1 mRNA表達(dá)的影響：
　　 MCD模型組及Ad-

35、GFP導(dǎo)入組肝組織TNF-α、IL-6和SOCS-1 mRNA表達(dá)較對(duì)照組明顯升高；與模型組比較，血晶素組肝組織TNF-α、IL-6和SOCS-1 mRNA表達(dá)顯著下降，而鋅原卟啉組TNF-α、IL-6和SOCS-1 mRNA表達(dá)進(jìn)一步升高；與Ad-GFP導(dǎo)入組比較，Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組TNF-α、IL-6和SOCS-1 mRNA表達(dá)顯著下降，而血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合

36、應(yīng)用組三者間TNF-α、IL-6和SOCS-1 mRNA表達(dá)無(wú)明顯差異。
　　 7.HO-1調(diào)控對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠肝組織纖維化相關(guān)因子α-SMA、TGF-β1、MMP-2和MMP-9 mRNA及蛋白表達(dá)的影響：
　　 MCD模型組及Ad-GFP導(dǎo)入組肝組織α-SMA、TGF-β1、MMP-2和MMP-9 mRNA表達(dá)較對(duì)照組明顯升高；與模型組比較，血晶素組肝組織α-SMA、TGF-β1、MMP-2和MMP-9 mRNA表達(dá)顯著下

37、降，而鋅原卟啉組α-SMA、TGF-β1、MMP-2和MMP-9 mRNA表達(dá)進(jìn)一步升高；與Ad-GFP導(dǎo)入組對(duì)比，Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組α-SMA、TGF-β1、MMP-2和MMP-9 mRNA表達(dá)顯著下降，而血晶素組、Ad-HO-1導(dǎo)入組和血晶素與Ad-HO-1聯(lián)合應(yīng)用組三者間α-SMA、TGF-β1、MMP-2和MMP-9 mRNA表達(dá)無(wú)明顯差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.HO-1表