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1、目的:觀察在核因子κB受體活化子配體(RANKL)的作用下,類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis,RA)滑膜CD68<'+>細(xì)胞在體外分化的特性,探討RA滑膜CD68<'+>細(xì)胞與前體破骨細(xì)胞的關(guān)系.材料和方法1.取6例RA和6例正常關(guān)節(jié)的滑膜組織,膠原酶消化法獲得滑膜細(xì)胞,用免疫磁珠法篩選滑膜CD68<'+>和CD68<'->細(xì)胞.流式細(xì)胞儀檢測(cè)篩選效能;CD68抗體免疫組化染色觀察RA和正常關(guān)節(jié)滑膜組織篩選前后滑
2、膜CD68<'+>細(xì)胞所占比例.MTT法觀察篩選后細(xì)胞增殖活性.2.將篩選獲得的RA和正?;D68<'+>和CD68<'->細(xì)胞分別直接用外源性的RANKL誘導(dǎo)分化,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、降鈣素受體免疫熒光檢測(cè)、骨吸收陷窩形成等方法鑒定誘導(dǎo)分化后的滑膜細(xì)胞.3.在RA滑膜CD68<'+>細(xì)胞培養(yǎng)液中加入0ng/ml到8ng/ml不同梯度濃度的RANKL,觀察不同濃度RANKL對(duì)RA滑膜CD68<'+>細(xì)胞分化的影響.
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