硼替佐米對人骨髓瘤細胞株RPMI8226RANKL表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、[目的]： 1.觀察蛋白酶體抑制劑硼替佐米誘導人骨髓瘤細胞株RPM18226細胞凋亡的作用。 2.明確硼替佐米對RPM18226細胞NF-κB受體活化因子配體(receptoractivatorofNF-κBLigand，RANKL)表達的影響。 [方法]： RPM18226細胞株用10％FBS-DMEM培養(yǎng)液，置于37℃，5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。根據(jù)參考文獻和預實驗結(jié)果，選擇硼替佐米終濃度分別是10n

2、mol/L、20nmol/L和40nmol/L的培養(yǎng)液組為三個實驗組，不加藥物的培養(yǎng)液組為對照組。 1.TUNEL法流式細胞術分析凋亡細胞； 2.分光光度法檢測細胞Caspase-3酶的活性。 3.WesternBlot法檢測細胞RANKL蛋白表達量的改變。 [結(jié)果]： 1.10nmol/L、20nmol/L和40nmol/L三種濃度的硼替佐米分別作用6h和24h后，均導致RPM18226細胞凋亡

3、率增加，與空白組比差異有統(tǒng)計學意義，10nmol/L處理6h組P＜0.05，其余各組P＜0.01。表明硼替佐米低、中、高三種濃度在體外均可誘導RPM18226細胞發(fā)生凋亡。 2.10nmol/L、20nmol/L和40nmol/L的硼替佐米作用6h和24h后，Caspase-3酶的活性增加。硼替佐米作用6小時三組的Caspase-3酶活性分別是空白組的1.80、3.20和4.69倍；作用24小時三組的Caspase-3酶活性分別

4、是空白組的5.10、6.50和8.38倍。與空白組比，10nmol/L處理6h組差異無明顯統(tǒng)計學意義，其余各組差異均有顯著的統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，且呈濃度依賴性(組內(nèi)兩兩比較，P＜0.01)。 3.10nmol/L、20nmol/L和40nmol/L幾三種濃度的硼替佐米處理細胞6h和24h后，各組的RANKL表達量均下降，與對照組比差異有統(tǒng)計學意義，其中10nmol/L組和20nmol/L處理6h組P＜0.05，其余各組P

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