慢性鼻—鼻竇炎細(xì)菌PCR檢測和傳統(tǒng)培養(yǎng)對比分析.pdf

1、目的:應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)法檢測鼻竇膿黏膜標(biāo)本中5種常見需氧菌的分布,并與傳統(tǒng)培養(yǎng)法比較,旨在探討PCR法在慢性鼻-鼻竇炎(ChronicRhinosinusitis,CRS)細(xì)菌檢測中的臨床應(yīng)用價值,并了解CRS中的常見菌群分布。
　　 方法:①收集30例CRS手術(shù)患者的鼻竇膿黏膜標(biāo)本分為兩份,一份標(biāo)本行傳統(tǒng)需氧菌培養(yǎng)及藥敏試驗,另一份標(biāo)本置-80℃冰箱保存用于后續(xù)PCR法

2、檢測。②依據(jù)文獻(xiàn)報道并參考同期的傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果,確立本次實驗檢測的5種實驗菌。引用文獻(xiàn)報道的細(xì)菌通用引物和5種實驗菌菌種特異性引物對上述臨床標(biāo)本進(jìn)行PCR擴增,瓊脂糖凝膠電泳分析擴增產(chǎn)物,最后在紫外檢測儀下觀察結(jié)果并拍照。設(shè)立實驗菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陽性對照,無菌雙蒸水作為陰性對照。
　　 結(jié)果:①傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示:30例標(biāo)本中需氧菌培養(yǎng)的總陽性率為80.0%(24/30),主要菌種培養(yǎng)陽性率分別為凝固酶陰性葡萄球菌43.3%

3、(13/30)、草綠色鏈球菌和干燥奈瑟菌各20.0%(6/30)、表皮葡萄球菌13.3%(4/30)、肺炎克雷伯菌10.0%(3/30)、金黃色葡萄球菌6.7%(2/30)等。②PCR檢測結(jié)果顯示:30例標(biāo)本中細(xì)菌總陽性率為83.3%(25/30),5種實驗菌的陽性率分別為表皮葡萄球菌40.0%(12/30)、肺炎克雷伯菌36.7%(11/30)、金黃色葡萄球菌23.3%(7/30)、流感嗜血桿菌10.0%(3/30),肺炎鏈球菌0.0

4、%(0/30)。③兩種方法檢出表皮葡萄球菌和肺炎克雷伯菌的陽性率經(jīng)配對X2檢驗存在統(tǒng)計學(xué)差異,X2值均為6.2,P＜0.05;檢出金黃色葡萄球菌和流感嗜血桿菌的陽性率經(jīng)配對X2檢驗無統(tǒng)計學(xué)差異,X2值分別為3.2和1.3,P＞0.05。以細(xì)菌培養(yǎng)為參考標(biāo)準(zhǔn),PCR技術(shù)對表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和金黃色葡萄球菌的敏感性均為100%,特異性分別為69.2%、70.4%和82.1%,一致性分別為73.3%、73.3%和83.3%。