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文檔簡(jiǎn)介
1、原發(fā)性肝癌(Primaryhepaticcarcinoma)又稱(chēng)肝癌,是世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤,其中肝細(xì)胞癌(HepatocellularCarcinoma,HCC)約占肝癌的90%,傳統(tǒng)的治療方法效果欠佳。隨著分子生物學(xué)的迅猛拓展,以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的進(jìn)步,基因治療各種惡性腫瘤成為新的研究熱點(diǎn),但是如何使外源基因安全而穩(wěn)定的在肝癌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)成為難題,即如何增強(qiáng)外源基因的靶向性成為亟待解決的問(wèn)題。
目的:
以乙
2、肝病毒衣殼(HBVE)為基因運(yùn)載體,聯(lián)合AFP啟動(dòng)子,觀察通過(guò)上述二者的雙重靶向作用是否可以使IL-2基因在肝癌細(xì)胞中靶向表達(dá)。
方法:
1.體外培養(yǎng)HepG2、L02、HepG2.2.15細(xì)胞;2.PEG8000濃縮法提取HBVE作為基因運(yùn)載體;3.PCR法制備人AFP啟動(dòng)子-IL-2重組基因,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞與L02細(xì)胞;4.RT-PCR觀察IL-2mRNA表達(dá);5.WesternBlot觀察IL-2蛋白表
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