KAI1-CD82在人早孕期母-胎界面的表達及其對滋養(yǎng)細胞侵襲性的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、正常妊娠類似于成功的同種異體移植，母體對攜帶父系抗原的胚胎不僅不排斥，而且允許胎兒在子宮內(nèi)生長發(fā)育直至分娩；這一過程有賴于獨特的母-胎界面免疫微環(huán)境，以及母體對胚胎抗原的免疫耐受狀態(tài)的建立和維持；同時還需要母-胎界面生物學(xué)功能的精密調(diào)控，特別是滋養(yǎng)細胞的生長及侵襲能力在正常早期妊娠的維持中至關(guān)重要；否則可能導(dǎo)致妊娠失敗，從而發(fā)生自然流產(chǎn)。 KAI1／CD82是多種腫瘤中普遍表達的一種轉(zhuǎn)移抑制基因，在抑制腫瘤細胞的活力、侵襲和轉(zhuǎn)移

2、中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。母-胎界面中滋養(yǎng)細胞具有侵襲母體蛻膜組織的能力，但相對于惡性腫瘤的侵襲來說，滋養(yǎng)細胞的侵襲能力受到嚴(yán)格限制。本文擬研究轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1／CD82在母-胎界面的作用機制，從而有助于胚泡植入及滋養(yǎng)細胞侵襲調(diào)控的理解。 第一部分：轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1／CD82在人早孕期母胎界面的表達。 目的：以早孕期正常妊娠為對照，探討腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1／CD82在反復(fù)自然流產(chǎn)絨毛和蛻膜組織中的表達，為研究和

3、治療反復(fù)自然流產(chǎn)等妊娠疾患提供新線索。 方法：以胚胎植入與腫瘤轉(zhuǎn)移侵襲相似為切入點，分別采用RT-PCR和Real-time PCR、免疫組化和Western-blot技術(shù)分析KAI1／CD82在人早孕期正常妊娠和反復(fù)自然流產(chǎn)的絨毛和蛻膜組織中的轉(zhuǎn)錄及翻譯水平。 結(jié)果：反復(fù)自然流產(chǎn)母-胎界面KAIl／CD82轉(zhuǎn)錄水平明顯高于正常妊娠(P<0．05)。反復(fù)自然流產(chǎn)的蛻膜組織KAI1／CD82蛋白表達明顯高于正常妊娠(P<0

4、．05)；而在絨毛組織中不表達KAI1／CD82蛋白。 結(jié)論：蛻膜組織轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1／CD82高表達可能抑制滋養(yǎng)細胞侵襲，從而導(dǎo)致自然流產(chǎn)的發(fā)生。 第二部分：人蛻膜基質(zhì)細胞通過表達KAI1/CD82降調(diào)節(jié)滋養(yǎng)細胞細胞侵襲性。 目的：為了進一步探討KAI1/CD82在母一胎界面的生物學(xué)作用，通過蛻膜基質(zhì)細胞(DSC)與滋養(yǎng)細胞(VCT)共培養(yǎng)模型探討KAI1/CD82在人母一胎界面的調(diào)節(jié)作用。 方法：

5、模擬DSC和VCT體內(nèi)接觸微環(huán)境，建立了人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞(ESC)和滋養(yǎng)細胞BEWO細胞株共培養(yǎng)體系，對ESC細胞進行RNA干擾，探討ESC可能通過表達KAI1/CD82對滋養(yǎng)細胞侵襲性的調(diào)節(jié)作用。 結(jié)果：ESC與滋養(yǎng)細胞共培養(yǎng)促進了滋養(yǎng)細胞的侵襲能力。采用RNA干擾技術(shù)成功地使ESC細胞KAI1/CD82基因沉默。沉默了KAI1/CD82基因的ESC細胞可導(dǎo)致BEWO細胞侵襲力進一步增強。 結(jié)論：蛻膜基質(zhì)細胞表達的K

6、AI1/CD82可抑制滋養(yǎng)細胞的侵襲，KAI1/CD82在精密調(diào)控滋養(yǎng)細胞的過度侵襲中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。 第三部分：KAI1/CD82不參與環(huán)孢素升調(diào)節(jié)滋養(yǎng)細胞的侵襲能力。 目的：擬探討KAI1/CD82是否參與環(huán)孢素(CsA)促進滋養(yǎng)細胞的侵襲能力。 方法：分離純化蛻膜基質(zhì)細胞，并采用流式細胞術(shù)和In-cell Western方法分析CsA處理后蛻膜基質(zhì)細胞CD82的表達。 結(jié)果：經(jīng)CsA不同濃度和不同