Kai1-CD82在大腸癌細(xì)胞系的表達(dá)及其表達(dá)下調(diào)機(jī)制的初步研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文Kai1CD82在大腸癌細(xì)胞系的表達(dá)及其表達(dá)下調(diào)機(jī)制的初步研究姓名：楊光之申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：病理學(xué)指導(dǎo)教師：丁彥青2002.5.30摘要大腸癌轉(zhuǎn)移是一個(gè)極其復(fù)雜的過(guò)程，是腫瘤細(xì)胞和宿主相互作用的共同結(jié)果。Kail基因在這一過(guò)程中起抑制作用。f該基因于1995年發(fā)現(xiàn)，其表達(dá)產(chǎn)物為CD82，是TM4SF(transmembrane4superfamily)或稱(chēng)TST(m仃aspantransmembrane)家

2、族成員。該家族結(jié)構(gòu)的最大特點(diǎn)是由4個(gè)疏水保守區(qū)構(gòu)成跨膜區(qū)(transmembrane1transmembrane4，TMITM4)。在TMl與TM2之間、TM3與TM4之間分別有～個(gè)較小與較大的膜外半環(huán)樣結(jié)構(gòu)(extracellularloop1、extracellularloop2ECl、EC2)，EC2區(qū)還有3個(gè)潛在的糖基結(jié)合位點(diǎn)，膜內(nèi)則有較短的氨基和羧基末端。結(jié)構(gòu)分析提示它在細(xì)胞與細(xì)胞間粘附、細(xì)胞與基質(zhì)的連接中可能起有一定作用，研

3、究也證實(shí)它可以增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞之間的聚集能力，降低其吞噬能力及侵襲能力，而不影響細(xì)胞的增殖力。／。目前研究證實(shí)Kail／CD82對(duì)多種腫瘤轉(zhuǎn)移具有抑制作用，但其與大腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究尚不多，特別是其表達(dá)下調(diào)的機(jī)制未有報(bào)道。為探討Kail基因與大腸癌轉(zhuǎn)移之間的相關(guān)性，本研究利用四種不同轉(zhuǎn)移潛能的大腸癌細(xì)胞系HCTll6、HT29、L0v0與SW480，從mRNA與蛋白質(zhì)水平，用原位核酸雜交、免疫組織化學(xué)與WesternBlot三種方法檢測(cè)K

4、ail／CD82的表達(dá)，得到了一致的結(jié)果：Kail／CD82在HT29與SW480細(xì)胞系的表達(dá)較LoVo與HCTll6為高。為進(jìn)一步探討Kail基因表達(dá)下調(diào)的機(jī)制，本研究用PCRsSCP技術(shù)分析了Kail，CD82表達(dá)較低的LoVo與HCTll6細(xì)胞系的Kail基因第3一lO外顯子是否存在點(diǎn)突變，檢測(cè)Kail基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島的甲基化狀況，并用免疫組化與WesternBlot等方法研究Kait基因表達(dá)與p53異常之間的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)結(jié)