CD82-KAI1和CD9-MRP-1在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中的表達(dá)及表達(dá)意義的初步研究.pdf

1、目的：膠質(zhì)瘤是嚴(yán)重危害人類健康的疾病之一,是一種最常見的顱內(nèi)原發(fā)惡性腫瘤。近年來,膠質(zhì)瘤的發(fā)病率和死亡率在國(guó)內(nèi)外均有明顯增加,其惡性程度高者預(yù)后十分差。膠質(zhì)瘤細(xì)胞本身超乎尋常的局部侵襲、轉(zhuǎn)移能力是疾病治療過程中所面臨的巨大挑戰(zhàn)。研究表明,通過對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因子的檢測(cè)可預(yù)判患者預(yù)后的情況,甚至可以為膠質(zhì)瘤的基因治療提供潛在靶點(diǎn)的理論依據(jù)。已有研究表明CD82/KAI1、CD9/MRP-1在眾多實(shí)體性惡性腫瘤轉(zhuǎn)移和增殖中發(fā)揮作用,為進(jìn)一步研

2、究CD82/KAI1、CD9/MRP-1在膠質(zhì)瘤細(xì)胞發(fā)生遷移、增殖中的作用,本文以兩種惡性程度存在差異的膠質(zhì)瘤細(xì)胞株(CHG-5、U251)為研究對(duì)象,采用細(xì)胞培養(yǎng)、免疫細(xì)胞化學(xué)、PT-PCR等方法從mRNA和蛋白水平初步檢測(cè)CD82/K-AI1、CD9/MRP-1的表達(dá)水平,探索其與膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移力和增殖力的關(guān)系。
　　 方法：1.免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)分別觀察CHG-5、U251中CD82/KAI1、CD9/MRP-1的表達(dá)情況。

3、2.RT-PCR分別觀察CHG-5、U251中CD82/KAI1mRNA、CD9/MRP-1mRNA的表達(dá)情況。3.分別設(shè)立1:100、1:200CD82/KAI1抗體干預(yù)組和空白對(duì)照組,通過劃痕試驗(yàn)于24h、48h觀察CD82/KAI1對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。4.分別設(shè)立1:100、1:200、1:400 CD9/MRP-1抗體干預(yù)組和空白對(duì)照組,通過流式細(xì)胞術(shù)于24h、48h觀察CD9/MRP-1對(duì)細(xì)胞周期的影響并進(jìn)行統(tǒng)

4、計(jì)分析。
　　 結(jié)果：1.U251細(xì)胞組中CD82/KAI1及CD9/MRP-1的蛋白水平表達(dá)均高于CHG-5細(xì)胞組,差異有顯著性(P<0.01)；2.U251細(xì)胞組中CD82/KAI1mRNA及CD9/MRP-1mRNA表達(dá)均高于CHG-5細(xì)胞組,差異有顯著性(P<0.01)；3.U251細(xì)胞CD82/KAI1抗體干預(yù)組遷移細(xì)胞數(shù)量高于對(duì)照組(P<0.05),且遷移細(xì)胞數(shù)量隨抗體濃度升高而增加(P<0.05)。4.CHG-5細(xì)

5、胞CD9/MRP-1抗體干預(yù)組中細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期,高于對(duì)照組(24h:P<0.05；48h:P<0.01),且比例隨抗體濃度升高而增加(P<0.05)。5.U251細(xì)胞CD9/MRP-1抗體干預(yù)組中細(xì)胞周期阻滯于S期,高于對(duì)照組(24h:P<0.01；48h:P<0.01),且比例隨抗體濃度升高而呈現(xiàn)上升趨勢(shì)(P<0.05)。
　　 結(jié)論：CD82/KAI、CD9/MRP-1均在惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中表達(dá),且兩者在U251