p38MAPK-NF-κB在慢性間歇低氧誘導(dǎo)的NASH中調(diào)控作用的研究.pdf

1、目的：近年研究顯示睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(SAHS)可導(dǎo)致肝臟靶向損害，SAHS及其特征性的慢性間歇低氧可促使肝臟從單純性脂肪肝向脂肪性肝炎進展，氧化應(yīng)激在肝臟炎癥中起重要作用。但SAHS及其間歇低氧誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激經(jīng)由何種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑引發(fā)肝臟炎癥反應(yīng)，其確切的調(diào)控機制不明。p38MAPK/NF-κB系細胞內(nèi)經(jīng)典的炎性信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，對于炎性細胞因子產(chǎn)生起著重要的調(diào)控作用，可能參與了慢性間歇低氧肝損傷的調(diào)控機制。因此本研究通過模擬人的SA

2、HS建立間歇低氧大鼠動物模型，從在體水平研究p38 MAPK/NF-κB信號通路在間歇低氧所致的肝臟炎癥中的調(diào)控作用及交互影響，探討間歇低氧促使脂肪性肝炎發(fā)生、發(fā)展可能的分子機制。
　　方法：將48只雄性Wistar大鼠隨機分為6組，每組各8只?？瞻讓φ战M普通鼠料喂養(yǎng)，高脂組高脂飼料喂養(yǎng)，間歇低氧組給予8h/d的間歇低氧處理，高脂+間歇低氧組高脂飼料喂養(yǎng)同時給予8h/d的間歇低氧處理，SB203580組和SN50組高脂飼料喂養(yǎng)同時

3、給予8h/d的間歇低氧處理，并于實驗結(jié)束前分別連續(xù)兩日靜脈注射SB203580和SN50。實驗滿4周后處死各組大鼠，留取血標本、肝組織，檢測血液肝酶、血脂、氧化應(yīng)激指標、系統(tǒng)性炎癥指標，觀察大鼠肝臟組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)的變化，并應(yīng)用蛋白免疫印記技術(shù)(western-blot)檢測肝組織勻漿p38 MAPK、NF-κB蛋白的表達。
　　結(jié)果：①間歇低氧對大鼠肝臟功能和結(jié)構(gòu)的影響:對照組大鼠肝臟功能和結(jié)構(gòu)未見異常。高脂+間歇低氧組大鼠血A

4、LT、AST水平顯著高于對照組、高脂組和間歇低氧組:SB203580組和SN50組肝酶水平較高脂+間歇低氧組未見明顯下降;光鏡及透射電鏡觀察高脂組和間歇低氧組均出現(xiàn)脂肪變性，高脂組脂肪變性重于間歇低氧組，間歇低氧組開始出現(xiàn)脂肪性肝炎，高脂+間歇低氧組損傷最嚴重，表現(xiàn)為脂肪性肝炎和纖維組織增生;SB203580組和SN50組損傷程度較高脂+間歇低氧組減輕。②間歇低氧對大鼠氧化應(yīng)激和系統(tǒng)性炎癥指標的影響:與對照組相比，高脂組、間歇低氧組、高

5、脂+間歇低氧組血清MDA的水平顯著升高，SN50組血清MDA的水平較高脂+間歇低氧組明顯下降;與對照組相比，高脂組、間歇低氧組、高脂+間歇低氧組血清TNF-α水平顯著升高，其中高脂組和高脂+間歇低氧組升高更顯著，SN50組較高脂+間歇低氧組血清TNF-α水平下降明顯;高脂＋間歇低氧組血清IL-1水平顯著高于對照組、高脂組、間歇低氧組，SN50組血IL-1水平較高脂+間歇低氧組下降明顯。③間歇低氧對大鼠肝臟NF-κ B和p38 MAPK蛋

6、白表達的影響:間歇低氧組、高脂+間歇低氧組肝臟NF-κB表達水平明顯高于對照組，高脂+間歇低氧組顯著高于間歇低氧組，間歇低氧組顯著高于高脂組，對照組與高脂組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義;高脂組、間歇低氧組、高脂+間歇低氧組肝臟p38 MAPK表達水平明顯高于對照組，高脂+間歇低氧組顯著高于間歇低氧組，間歇低氧組顯著高于高脂組;SB203580組和SN50組p38 MAPK與NF-κB表達水平較高脂+間歇低氧組均有明顯下降。
　　結(jié)論：本研

7、究證實①慢性間歇低氧可導(dǎo)致大鼠肝損傷，特別是在高脂飲食基礎(chǔ)上:肝損傷表現(xiàn)為肝酶水平升高，肝組織病理學(xué)表現(xiàn)為非酒精性脂肪性肝炎組織學(xué)特征。證實慢性間歇低氧可促進非酒精性脂肪性肝炎發(fā)生發(fā)展。②慢性間歇低氧導(dǎo)致的肝損傷過程中，伴隨著機體氧化應(yīng)激反應(yīng)增強及系統(tǒng)性炎癥發(fā)生。③慢性間歇低氧可活化p38 MAPK和NF-κB信號通路，特異性阻斷兩條信號通路，可不同程度抑制兩條信號通路活化，可減輕慢性間歇低氧導(dǎo)致的肝損傷。表明p38 MAPK和NF-κ