防制仔豬大腸桿菌性腹瀉四價菌毛蛋白卵黃粉的研制.pdf

1、初生和斷奶仔豬大腸桿菌性腹瀉病的主要病原是產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(Enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC)。ETEC的致病作用與其具有黏附素性菌毛和產(chǎn)腸毒素密切相關(guān)，二者缺一不可。與仔豬腹瀉有關(guān)的黏附素抗原主要有K88、K99、987P和F41。ETEC致病過程中重要的一個環(huán)節(jié)是細(xì)菌借黏附素性菌毛黏附固定在仔豬小腸絨毛上皮細(xì)胞上，進(jìn)而增殖并產(chǎn)生大量腸毒素引起小腸吸收分泌功能失常而致腹瀉。在對該病的傳統(tǒng)防制上

2、主要采用大腸桿菌多價苗、抗菌藥物或動物高免血清，但是每種方法各有其缺陷。目前，卵黃抗體作為一類可替代抗生素的高效生物防治制劑在治療和預(yù)防新生和斷奶仔豬大腸桿菌性腹瀉中的作用受到了國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。 本研究分別對28周齡的開產(chǎn)母雞采用大腸桿菌四價(K88、K99、987P、F41)混合菌毛蛋白苗免疫和菌體免疫，比較兩種方法獲得結(jié)果的差異。結(jié)果表明，兩種方法均可以獲得卵黃抗體，但菌毛免疫獲得的效價均高于菌體免疫。其中菌毛免疫的K88

3、的效價比菌體免疫高2個滴度左右，達(dá)到2<'9>。在此基礎(chǔ)上用菌毛蛋白苗免疫開產(chǎn)母雞，三免后卵黃抗體效價已經(jīng)達(dá)到較高水平，且高峰期可以維持三個月左右。對所獲得的高免卵黃液進(jìn)行噴霧干燥，結(jié)果表明，140℃進(jìn)氣,72℃出氣最適合高免卵黃粉的制得，且卵黃粉中IgY活性不變。 為了進(jìn)一步研究高免卵黃粉的穩(wěn)定性，本實驗采用溫度梯度，pH梯度，蛋白酶以及保存時間長短的不同等外部因素檢測試驗制得的高免卵黃粉中IgY活性的穩(wěn)定性，結(jié)果顯示本實驗制

4、得的高免卵黃粉穩(wěn)定性良好，具有耐酸、耐堿、耐蛋白酶、易于保存等特性。 通過ETEC對仔豬小腸上皮細(xì)胞的粘附和粘附抑制試驗，表明噴霧干燥前后的高效價卵黃抗體均能有效地阻止ETEC對仔豬小腸上皮細(xì)胞的粘附。實驗中，粘附組單個細(xì)胞粘附的K88<'+>菌數(shù)平均為23.79個；噴霧干燥前的卵黃抗體處理的K88粘附抑制組單個細(xì)胞粘附的K88<'+>ETEC數(shù)平均為1.98個，P<0.01；噴霧干燥后的卵黃抗體處理的K88粘附抑制組單個細(xì)胞粘