豬MHC和轉(zhuǎn)鐵蛋白多態(tài)性與仔豬大腸桿菌K88腹瀉關(guān)系的研究.pdf

1、為探討SLA及轉(zhuǎn)鐵蛋白多態(tài)性與仔豬大腸桿菌K88腹瀉的關(guān)系,該研究利用PCR產(chǎn)物直接測序技術(shù)、PCR-SSCP技術(shù)和不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠蛋白電泳技術(shù),以兩個(gè)中國地方豬種久仰香豬、劍白香豬和一個(gè)外國豬種長白豬同胞半同胞0-28日齡仔豬混合家系試驗(yàn)豬群為試驗(yàn)材料,研究了SLA-DQB外顯子2、SLA-DRB外顯子2、SLA-DQB近端調(diào)控區(qū)、SLA-DRB近端調(diào)控區(qū)以及轉(zhuǎn)鐵蛋白的多態(tài)性,分析了這些多態(tài)位點(diǎn)對0-28日齡仔豬大腸桿菌K88ab

2、、K88ac和K88ad小腸粘附型以及血清IgG含量的影響,以尋找有用的遺傳標(biāo)記應(yīng)用于豬的抗病育種實(shí)踐.研究結(jié)果表明:(1)SLA-DQB外顯子2和SLA-DRB外顯子2中存在豐富的多態(tài)位點(diǎn).SLA-DQB外顯子2中存在38個(gè)多態(tài)位點(diǎn),占所擴(kuò)增序列總長度的13.9﹪;而SLA-DRB外顯子2中的多態(tài)位點(diǎn)高達(dá)62個(gè),占擴(kuò)增序列總長度的25.3﹪.(2)SLA-DQB外顯子2中位點(diǎn)111、113、114、142、184對0-28日齡仔豬血清

3、IgG含量有顯著影響(p<0.05);SLA-DRB外顯子2中位點(diǎn)29、149、170對0-28日齡仔豬血清IgG含量有顯著影響(P<0.05),某些位點(diǎn)不同的基因型之間血清IgG含量差異顯著(p<0.05),但血清IgG含量最小二乘均值最高的基因型并不特異的分布在某個(gè)或某些品種(系)中;這8個(gè)位點(diǎn)的基因頻率在所研究三個(gè)豬種(系)中差異顯著.(3)SLA-DQB外顯子2中的多態(tài)位點(diǎn)與仔豬大腸桿菌K88ab、K88ac、K88ad粘附表型

4、之間沒有關(guān)聯(lián)(p>0.01).SLA-DRB外顯子2中位點(diǎn)29與仔豬大腸桿菌K88ad粘附表型存在顯著的關(guān)聯(lián)(p<0.01).(4)首次得到了SLA-DRB基因5′上游近端調(diào)控區(qū)(URR)序列(GenBank序列號AY365420)和SLA-DQB基因的5′上游近端調(diào)控區(qū)(URR)序列(GenBank序列號AY456637).分析表明其含有MHCⅡ類基因調(diào)控區(qū)共有的高度保守的調(diào)控元件X box,W box,Y box及CCAAT,TAT

5、A box等,而且這些調(diào)控元件遵循嚴(yán)格的空間順序;總共得到了12個(gè)SLA-DRB和14個(gè)SLA-DQB近端調(diào)控區(qū)新等位基因序列,這26條序列中都存在MHCⅡ類基因共有的調(diào)控元件如X box,W box,Y box及CCAAT,TATA box等且遵循嚴(yán)格的空間順序.(5)在SLA-DQB近端調(diào)控區(qū)發(fā)現(xiàn)了9個(gè)多態(tài)位點(diǎn);在SLA-DRB近端調(diào)控區(qū)發(fā)現(xiàn)了24個(gè)多態(tài)位點(diǎn).SLA-DRB近端調(diào)控區(qū)的多態(tài)性比SLA-DQB近端調(diào)控區(qū)高的多;調(diào)控元件

6、中Y box在DRB基因近端調(diào)控區(qū)中是多態(tài)的,DQB和DRB基因近端調(diào)控區(qū)中的其他調(diào)控元件卻全部是保守的.(6)SLA-DRB近端調(diào)控區(qū)位點(diǎn)-12和-28對0-28日齡仔豬血清IgG含量有顯著的影響(p<0.05),而SLA-DQB近端調(diào)控區(qū)中9個(gè)多態(tài)位點(diǎn)對0-28日齡仔豬血清中IgG含量影響不顯著(p>0.05);SLA-DRB近端調(diào)控區(qū)的多態(tài)位點(diǎn)與仔豬大腸桿菌K88ab、K88ac、K88ad粘附表型沒有顯著的關(guān)聯(lián)(p>0.01);