心肌缺血晚期再灌注后心肌損傷及其與NF-κB的關(guān)系.pdf

1、目的 研究表明，心肌梗死(myocardial infarction，MI)后晚期開通梗死相關(guān)血管仍然有利于改善心肌重構(gòu)，保護(hù)心功能。最近，我們的研究顯示，超過一定時(shí)間的缺血再灌注仍然存在氧化應(yīng)激、梗死周邊區(qū)細(xì)胞凋亡增加等現(xiàn)象，提示存在晚期缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury，IRI)。既往的研究表明，在急性缺血再灌注損傷的病理生理過程中核因子-кB(nuclear factor kappa-B

2、，NF-кB)起重要作用，而吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)具有抑制NF-кB活性，抗氧化等作用。本研究目的是通過復(fù)制兔的心肌梗死模型來觀察心肌缺血晚期再灌注導(dǎo)致的再灌注損傷現(xiàn)象，探討其與核因子NF-кB的關(guān)系以及PDTC可能的干預(yù)機(jī)制。 方法 32只健康家兔隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組(shamgroup，S)、持續(xù)缺血組(persistente ischemia gr

3、oup，I)、晚期再灌注組(lateischemia-reperfusion group，LI/R)、PDTC干預(yù)組(PDTC treatment group，P)，每組8只。所有動(dòng)物行靜脈麻醉，接心電圖機(jī)，經(jīng)胸骨左緣開胸暴露心臟，保持胸膜腔完好，動(dòng)物行自主呼吸，剪開心包，暴露前降支和回旋支以及回旋支的主要分支左室支，以眼科4—0針線穿過左室支。S組冠狀動(dòng)脈曠置6小時(shí)，I組冠狀動(dòng)脈持續(xù)結(jié)扎6小時(shí)，LI/R組結(jié)扎冠狀動(dòng)脈3小時(shí)后再灌注3小

4、時(shí)，P組結(jié)扎冠狀動(dòng)脈3小時(shí)后再灌注3小時(shí)，并于再灌注前十分鐘靜脈注入PDTc(200mg/kg)。動(dòng)物經(jīng)上述處理后處死，取出心臟，剪取心肌梗死邊緣區(qū)心肌組織。末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)介導(dǎo)的帶熒光的dUTP缺口末端標(biāo)記(TdT-mediated dUTP nick endlabeling，TUNEL)法測(cè)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)(apoptotic index，AI)；鏈霉親和素-生物素-過氧化酶復(fù)合物法測(cè)NF-кB和NF-кB抑制蛋白

5、(IкBα)表達(dá)；黃嘌呤氧化法測(cè)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性；比色法測(cè)谷胱甘肽還原酶(glutathione RedtJCase，GR)活性；巴比妥酸法測(cè)丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量。 結(jié)果 與S組相比，LI/R組、P組和I組梗死邊緣區(qū)心肌細(xì)胞的SOD、GR活性明顯降低，MDA含量增高，NF-кB、IкBα活性增加，心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)也顯著升高；LI/R組與

6、I組相比，SOD、GR活性降低，MDA含量增高，NF-кB、IкBα活性和凋亡指數(shù)均上升；P組與LI/R組相比SOD、GR活性升高，MDA含量降低，NF-кB活性降低，IкBα活性增加，心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)降低；結(jié)果均具有統(tǒng)一計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論 心肌缺血晚期再灌注可導(dǎo)致梗死邊緣區(qū)心肌細(xì)胞凋亡增加，提示存在再灌注損傷現(xiàn)象。氧化應(yīng)激增強(qiáng)、NF-кB的過度激活可能是導(dǎo)致晚期再灌注損傷的重要因素。PDTC預(yù)處理可改善梗