心肌缺血-再灌注后的肺組織損傷.pdf

1、研究背景:
　　 缺血/再灌注損傷是臨床上常見(jiàn)的一種損傷現(xiàn)象，損傷不僅僅發(fā)生于缺血/再灌注的器官本身，對(duì)其相鄰甚至遠(yuǎn)隔的器官亦造成一定的損傷，其中肺組織常被累及。心肌缺血/再灌注損傷最為常見(jiàn)也是迄今研究最多的器官缺血/再灌注損傷，已有研究表明心肌缺血/再灌注可引起的腦、肝、腎等器官的損傷，但是對(duì)肺組織是否也造成損傷，目前仍不明確。
　　 目前國(guó)內(nèi)外對(duì)心肌缺血/再灌注后對(duì)肺組織的損傷方面的研究報(bào)道較少。因此我們對(duì)大鼠心肌缺

2、血/再灌注損傷后對(duì)肺組織影響做相應(yīng)的研究可為基礎(chǔ)研究的進(jìn)一步深入及臨床工作中對(duì)疾病的診治提供一定的理論依據(jù)。
　　 目的:
　　 1.在現(xiàn)有文獻(xiàn)基礎(chǔ)上建立成年大鼠心肌缺血/再灌注損傷模型；
　　 2.電鏡下觀察大鼠心肌缺血/再灌注損傷后肺組織的病理學(xué)變化：
　　 3.檢測(cè)血清中CK的變化及血清和肺組織中MPO、ICAM-1、MDA和HSP70含量的變化：
　　 4.探討心肌的缺血/再灌注對(duì)肺組織損

3、傷的可能機(jī)制。
　　 材料與方法:
　　 健康雄性SD大鼠，成年大鼠（4-6月齡），購(gòu)自山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。分別隨機(jī)分為2組：偽手術(shù)對(duì)照組，缺血/再灌注損傷組。
　　 1.在體大鼠心肌缺血/再灌注損傷模型的建立
　　 偽手術(shù)對(duì)照組(n=10)：在左冠狀動(dòng)脈的前降支(LAD)下穿刺引線，不需要結(jié)扎，持續(xù)210min
　　 缺血/再灌注損傷組(n=10)：可使用活結(jié)結(jié)扎LAD使得心肌缺血，且持續(xù)

4、30min后，松開(kāi)活結(jié)，血流恢復(fù)，再灌注3h;
　　 2采用Even'sblue和TTC雙染色，測(cè)量心肌危險(xiǎn)區(qū)面積、測(cè)定梗塞區(qū)的面積。
　　 3.標(biāo)本收集再灌注3小時(shí)后開(kāi)腹，腹主動(dòng)脈處采血，靜置30min后離心(3000r/min15min)，上清液分裝后于-70℃冰箱保存?zhèn)溆?；采血完成后立即開(kāi)胸，切取部分右下肺組織，肝素生理鹽水洗凈，濾紙吸干，切塊分裝后保存于-70℃冰箱備用。
　　 4.取部分右肺組織10％甲

5、醛固定，石蠟包埋，HE染色。
　　 5.血清CK及血清和肺組織MPO、ICAM-1、MDA、HSP70的測(cè)定測(cè)定嚴(yán)格按照試劑盒上的操作步驟進(jìn)行測(cè)定。
　　 6.采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，把所得到數(shù)據(jù)以(x)±S表示，采用單因素方差分析(ANOVA)作均數(shù)間比較。以P＜0.05作為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.大鼠心肌缺血/再灌注損傷模型成功建立
　　 1.1

6、結(jié)扎左冠脈前降支(LAD)后，與偽手術(shù)對(duì)照組相比，心肌缺血/再灌注損傷組心電圖Ⅱ?qū)?lián)ST段弓背向上抬高到了0.15mV以上，表明心肌缺血。于30min后松開(kāi)活結(jié)放松結(jié)扎線，當(dāng)Ⅱ?qū)?lián)的ST段下降達(dá)1/2以上時(shí)，提示心肌組織恢復(fù)血液的灌流，即心肌缺血/再灌注損傷的模型成功建立（圖1）。
　　 1.2心肌梗塞面積在心肌缺血/再灌注損傷時(shí)的變化
　　 危險(xiǎn)區(qū)的面積/左心室面積的百分比(AAR/LV比值)：在偽手術(shù)對(duì)照組與缺血/再

7、灌注損傷組之間無(wú)明顯的差異，各模型的缺血程度基本一致，說(shuō)明手法均一，實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有可比性。
　　 心肌梗塞的面積/危險(xiǎn)區(qū)面積百分比（AN/AAR比值）：缺血/再灌注損傷組與偽手術(shù)對(duì)照組相比明顯增高（P＜0.05）（表2）。
　　 1.3心肌缺血/再灌注損傷時(shí)對(duì)血清CK活性變化的影響
　　 缺血/再灌注損傷組與偽手術(shù)對(duì)照組相比，血清里CK的活性顯著上升。
　　 2.心肌缺血/再灌注損傷對(duì)血清及肺組織MPO、I