高果糖包含對大鼠肝臟氧化應(yīng)激及PPARα表達的影響以及非諾貝特的干預(yù).pdf

1、目的:通過高果糖飲食喂養(yǎng)大鼠,研究大鼠肝臟氧化應(yīng)激及過氧化物酶體增殖物激活受體Q(PPARα)的表達以及給予非諾貝特干預(yù)后的變化。
　　 方法:
　　 72只大鼠隨機分為3組,正常對照組(N)、高果糖組(F)、高果糖加非諾貝特干預(yù)組(FF),每組24只,共喂養(yǎng)16周,非諾貝特干預(yù)組每日給大鼠灌注非諾貝特,其余組灌注生理鹽水。并在喂養(yǎng)8周后從各組隨機選出12只大鼠,從中再隨機選出8只行口服葡萄糖耐量實驗(OGTT),之后處

2、死選出的12只大鼠,觀察各組大鼠體重、肝重的變化,通過油紅O染色,光鏡觀察大鼠肝臟脂質(zhì)沉積情況;生化方法測定大鼠血清總甘油三酯、總膽固醇、血糖、ALT、AST等指標的含量以及肝臟總甘油三酯的含量;化學比色法檢測肝臟丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物岐化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)的變化;用RT-PCR和Western blotting的方法分析大鼠肝臟PPARα的mRNA和蛋白的表達。同樣在喂養(yǎng)16周后

3、從剩下的12只大鼠中選出8只行OGTT,之后處死12只大鼠并檢測上述指標。
　　 結(jié)果:
　　 1：大鼠體重、肝重的變化:8周及16周時各組大鼠體重無顯著差異,8周和16周時高果糖加非諾貝特干預(yù)組大鼠肝重指數(shù)明顯高于其他各組(P＜0.01),高果糖組較對照組顯著升高(P＜0.05);
　　 2：大鼠肝臟油紅O結(jié)果:8周及16周時高果糖組肝臟脂質(zhì)沉積明顯,非諾貝特干預(yù)組減少了肝臟脂質(zhì)沉積;
　　 3：空腹血

4、糖水平:8周和16周時高果糖組較對照組明顯升高(P＜0.01),非諾貝特干預(yù)組較高果糖組顯著下降(P＜0.05),但也顯著高于對照組(P＜0.05);
　　 4：OGTT實驗葡萄糖曲線下面積:8周和16周時高果糖組葡萄糖曲線下面積較其他各組顯著升高(P＜0.01),非諾貝特干預(yù)后顯著下降(P＜0.01),但仍顯著高于對照組(P＜0.01);
　　 5：血清生化結(jié)果:
　　 ①：喂養(yǎng)8周時各組大鼠血清ALT結(jié)果無顯

5、著差異,16周時高果糖組大鼠血清ALT水平較對照組升高(P＜0.01),予以非諾貝特干預(yù)后顯著下降(P＜0.01);8周及16周時高果糖組(F)大鼠AST較對照組顯著升高(P＜0.01),予以非諾貝特干預(yù)后顯著下降(P＜0.01);
　　 ②：喂養(yǎng)8周及16周后高果糖組血清甘油三酯水平較對照組顯著升高(P＜0.01),非諾貝特干預(yù)后血清甘油三酯水平顯著下降(P＜0.05);
　　 ③：血清總膽固醇水平:8周和16周高果糖

6、組血清膽固醇水平較對照組顯著升高(P＜0.01),非諾貝特干預(yù)后血清膽固醇水平顯著下降(P＜0.01);
　　 6：肝臟甘油三酯水平:喂養(yǎng)8周及16周后,高果糖組肝臟甘油三酯水平顯著升高(P＜0.01),非諾貝特干預(yù)后顯著下降(P＜0.01);
　　 7：氧化應(yīng)激水平:
　　 ①：喂養(yǎng)8周和16周后,高果糖組丙二醛(MDA)(2.33±0.05和1.99±0.21 nmol/mgprot)水平較對照組(1.87±

7、0.14和4.80±0.74nmol/mgprot)顯著增高(P＜0.01),非諾貝特干預(yù)后(1.89±0.20和2.80±0.29nmol/mgprot)顯著下降(P＜0.01);
　　 ②：8周及16周時高果糖組肝臟超氧化物岐化酶(SOD)活性(381.23±33.58和347.44±5.41U/mgprot)顯著低于正常對照組(280.40±25.24和277.34±21.90U/mgprot)(P＜0.01),非諾貝特干

8、預(yù)后SOD活性明顯升高;
　　 ③：8周及16周時高果糖組肝臟谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性.(378.04±13.78和287.21±18.95活力單位)顯著低于對照組(418.91±16.53和411.14±19.14活力單位)(P＜0.01),予以非諾貝特后GSH-PX活性(358.80±12.65和294.78±19.91)無顯著升高;
　　 ④：8周及16周時非諾貝特組過氧化氫酶(CAT)活性(56.9

9、2±4.64和53.45±5.97U/mgprot)顯著高于高果糖組(40.97±1.15和38.17±1.82U/mgprot)及對照組(41.75±2.46和39.00±3.53U/mgprot)(P＜0.01),高果糖組CAT活性與對照組無顯著差異;
　　 8：PPARα蛋白及mRNA的表達:喂養(yǎng)8周后及16周后,同對照組相比,高果糖組PPARα的mRNA及蛋白表達下降(P＜0.01),給予非諾貝特干預(yù)后蛋白表達顯著升高(

10、P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1：高果糖飲食使大鼠空腹血糖升高,大鼠糖耐量受損,非諾貝特干預(yù)可改善高果糖引起的糖耐量受損。
　　 2：高果糖飲食導致大鼠高甘油三酯血癥及高膽固醇血癥,并導致肝臟脂質(zhì)沉積,非諾貝特干預(yù)可改善高果糖引起的血脂異常及肝臟脂質(zhì)沉積。
　　 3：高果糖飲食可明顯升高肝臟氧化應(yīng)激水平,降低肝臟SOD及GSH活性,非諾貝特干預(yù)降低了高果糖飲食組的肝臟氧化應(yīng)激水平,可能與明顯升高了