2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過喂養(yǎng)高果糖飼料誘導(dǎo)大鼠肝臟脂質(zhì)沉積,觀察大鼠肝臟二?;视王;D(zhuǎn)移酶2(diacylglycerol acyltransferase2,DGAT2)、微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白(microsomal triglygeride transfer protein,MTP)、叉頭轉(zhuǎn)錄因子O1(forkhead transcription factor O1,FoxO1)的mRNA和蛋白表達(dá)水平,同時給予非諾貝特進(jìn)行干預(yù),探討高果糖誘導(dǎo)大

2、鼠肝臟脂質(zhì)沉積的機(jī)制,及非諾貝特對高果糖引起的肝臟脂質(zhì)沉積的干預(yù)作用。
   方法:
   清潔級雄性Wistar大鼠(體重200g左右)72只,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為正常對照組(normal control group,NC group)24只,高果糖組(high-fructose-fed group,HF group)24只,高果糖非諾貝特干預(yù)組(high-fructose-fed group with fenof

3、ibrate intervention,HFF group)24只。NC組給予基礎(chǔ)飼料(熱量組成:碳水化合物占65.5%,蛋白質(zhì)占24.2%,脂肪占10.3%),總熱量為348 kcal/100g;HF組和HFF組喂以高果糖飼料(熱量組成:碳水化合物占77%其中果糖占總熱量的34.5%,蛋白質(zhì)占16.3%,脂肪占6.7%),總熱量為319 kcal/100g。HFF組給予非諾貝特30 mg·kg-1·d-1灌胃,NC組和HF組給予生理鹽

4、水2ml/d灌胃。大鼠自由攝食飲水,每周稱體重1次。
   喂養(yǎng)第8周末和第16周末分兩批處死各組部分大鼠,處死前各組大鼠行口服葡萄糖耐量試驗(oral glucose tolerance test,OGTT)和高胰島素正葡萄糖鉗夾試驗(hyperinsulinaemic-euglycaemic clamp),了解各組大鼠葡萄糖負(fù)荷的耐受情況及葡萄糖輸注率(glucose infusion rate,GIR)的變化;頸動脈采血分

5、離血清測定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰島素(fasting serum insulin,FINS)、甘油三酯(serum triglyceride,TG)、總膽固醇(serum total cholesterol,TC)、游離脂肪酸(free fatty acids,FFAs)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartateaminotra

6、nsferase,AST),行蘇木素-伊紅(HE)染色和油紅O染色觀察肝臟是否存在脂質(zhì)沉積,透射電鏡觀察肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化;留取大鼠肝臟組織放入液氮中,-70℃低溫保存,測定肝臟甘油三酯含量并采用RT-PCR和Western Blotting技術(shù)測定肝臟組織DGAT2、MTP、FoxO1mRNA和蛋白表達(dá)水平。
   結(jié)果:
   1:喂養(yǎng)第8周末、第16周末,HF組與NC組相比,血清TC、TG、FFAs明顯升高,差異均

7、有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);HFF組與HF組相比,血清TC、TG、FFAs明顯降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);HFF組血清TC、TG、FFAs高于NC組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
   2:喂養(yǎng)第8周末、第16周末,HF組與NC組相比,FBG、FINS、葡萄糖曲線下面積(AUCglu)升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);HFF組與HF組相比,FBG、FINS、AUCglu明顯降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義

8、(P<0.05);HFF組FBG、FINS、AUCglu高于NC組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。喂養(yǎng)第8周末、第16周末,HF組與NC組相比,GIR明顯降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);HFF組與HF組相比,GIR明顯升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);HFF組GIR低于NC組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
   3:喂養(yǎng)第8周末,各組大鼠血清ALT、AST值無明顯差異(P>0.05);喂養(yǎng)第16周

9、末,HF組與NC組相比,血清ALT、AST明顯升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);HFF組與HF組相比,血清ALT、AST明顯降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);HFF組血清ALT、AST與NC組相比無明顯差異(P>0.05)。
   4:喂養(yǎng)第8周末、第16周末,HF組與NC組相比,肝臟甘油三酯含量明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);HFF組與HF組相比,肝臟甘油三酯含量明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.

10、01);HFF組肝臟甘油三酯含量高于NC組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
   5:肝組織切片HE染色及油紅O染色均顯示,NC組肝細(xì)胞無脂質(zhì)沉積,HF組肝細(xì)胞存在脂質(zhì)沉積,內(nèi)含大小不等的脂肪滴,且隨著喂養(yǎng)時間的延長HF組肝細(xì)胞脂質(zhì)沉積的程度明顯加重;HFF組肝細(xì)胞脂滴數(shù)量明顯減少。透射電鏡顯示,NC組大鼠肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)正常,未見脂滴分布;HF組大鼠肝細(xì)胞可見大量脂滴積聚,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出現(xiàn)顆粒融合和脫顆粒現(xiàn)象,部分雙層核膜融合

11、,核周隙消失;HFF組大鼠肝細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有少許脂滴,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有輕度的顆粒融合和脫顆?,F(xiàn)象。
   6:喂養(yǎng)第8周末,各組大鼠肝臟DGAT2、MTP和Foxo1 mRNA和蛋白表達(dá)水平無明顯差異(P>0.05);喂養(yǎng)第16周末,HF組與NC組相比,肝臟DGAT2、MTP和FoxO1 mRNA和蛋白表達(dá)水平升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);HFF組與HF組相比,DGAT2、MTP和FoxO1mRNA和蛋白表達(dá)水平降低,差異均

12、有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);HFF組DGAT2、MTP和FoxO1 mRNA和蛋白表達(dá)水平高于NC組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
   結(jié)論:
   1:高果糖飲食可以誘導(dǎo)大鼠胰島素抵抗、高脂血癥及肝臟脂質(zhì)沉積。
   2:高果糖可以導(dǎo)致大鼠肝細(xì)胞出現(xiàn)大泡性和微泡性脂肪變性,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出現(xiàn)顆粒融合和脫顆?,F(xiàn)象,部分雙層核膜融合,核周隙消失。
   3:高果糖可以上調(diào)肝臟DGAT2 mRNA和蛋

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