人乳頭瘤病毒（HPV）熒光PCR檢測(cè)試劑的臨床前研究.pdf

1、[目的]本研究旨在開(kāi)發(fā)一種適于臨床使用的診斷試劑，用于對(duì)引起宮頸 癌的HPV感染進(jìn)行早期發(fā)現(xiàn)和篩查，本報(bào)告總結(jié)了該產(chǎn)品研發(fā)的前期過(guò) 程。該產(chǎn)品研制的最終目的是希望可以向社會(huì)提供一種快速、準(zhǔn)確、靈 敏的HPV診斷試劑，作為宮頸癌及癌前病變?cè)缙诤Y查和監(jiān)控其發(fā)生和發(fā) 展的有效方法。 [方法]本產(chǎn)品采用熒光PCR方法，根據(jù)各高危型別HPV基因之間的同源性，通過(guò)對(duì)各通用型引物及探針的比較，以及PCR組成體系的優(yōu)化研究，確定了熒光P

2、CR產(chǎn)品的組成成分，進(jìn)而通過(guò)臨床前試驗(yàn)對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行客觀的質(zhì)量評(píng)估，確定其實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。 [結(jié)果]通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較發(fā)現(xiàn)，幾種通用型引物存在通用性不夠，或難以達(dá)到熒光PCR擴(kuò)增要求的缺點(diǎn)，幾種普通的Taqman通用型探針與其相應(yīng)引 物的配合程度不能達(dá)到熒光PCR靈敏檢測(cè)的要求，因此本產(chǎn)品確定使用Taqman MGB探針而且實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該探針的有效性。通過(guò)對(duì)包括引物種 類(lèi)和濃度、探針濃度、鎂離子、Taq酶等多種組份的優(yōu)化，最終確定了HPV