人乳頭瘤病毒（HPV）熒光PCR檢測試劑的臨床前研究.pdf

1、[目的]本研究旨在開發(fā)一種適于臨床使用的診斷試劑，用于對引起宮頸 癌的HPV感染進行早期發(fā)現(xiàn)和篩查，本報告總結了該產品研發(fā)的前期過 程。該產品研制的最終目的是希望可以向社會提供一種快速、準確、靈 敏的HPV診斷試劑，作為宮頸癌及癌前病變早期篩查和監(jiān)控其發(fā)生和發(fā) 展的有效方法。 [方法]本產品采用熒光PCR方法，根據各高危型別HPV基因之間的同源性，通過對各通用型引物及探針的比較，以及PCR組成體系的優(yōu)化研究，確定了熒光P

2、CR產品的組成成分，進而通過臨床前試驗對產品進行客觀的質量評估，確定其實際應用價值。 [結果]通過實驗比較發(fā)現(xiàn)，幾種通用型引物存在通用性不夠，或難以達到熒光PCR擴增要求的缺點，幾種普通的Taqman通用型探針與其相應引 物的配合程度不能達到熒光PCR靈敏檢測的要求，因此本產品確定使用Taqman MGB探針而且實驗證實了該探針的有效性。通過對包括引物種 類和濃度、探針濃度、鎂離子、Taq酶等多種組份的優(yōu)化，最終確定了HPV