微流控芯片檢測(cè)肺癌患者p16基因異常甲基化方法的建立.pdf_第1頁
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1、該研究通過建立利用微流控芯片檢測(cè)p16基因異常甲基化的方法,簡(jiǎn)化了傳統(tǒng)繁瑣的步驟,即利用微流控芯片代替以往的瓊脂糖凝膠電泳,不但節(jié)省了時(shí)間,更重要的是大大提高了靈敏度及特異性,并且可以進(jìn)行陣列式檢測(cè),提高了效率.該實(shí)驗(yàn)利用雙盲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肺癌患者腫瘤、血漿及其他腫瘤和非腫瘤患者血漿中的p16基因異常甲基化,探討微流控芯片檢測(cè)方法的靈敏度及特異性等,以期建立一種嶄新而可靠的早期肺癌臨床診斷方法.方法:通過對(duì)采集到腫瘤患者腫瘤標(biāo)本、血漿標(biāo)本及其

2、他腫瘤和非腫瘤患者的血漿標(biāo)本提取DNA,然后利用亞硫酸氫鹽對(duì)其DNA進(jìn)行堿基轉(zhuǎn)化,使甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而非甲基化的胞嘧啶不發(fā)生改變,之后通過經(jīng)典的甲基化特異性PCR對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng),然后對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物分別利用傳統(tǒng)的瓊脂糖凝膠電泳及新的微流控芯片方法進(jìn)行檢測(cè),比較其靈敏度及特異性有無差異.結(jié)論:微流控芯片與瓊脂糖凝膠電泳相比,其檢測(cè)靈敏度較后者提高至少27.5﹪,其特異性為90﹪,進(jìn)一步提高其檢測(cè)特異性,可以使其高靈敏度更加可信,從

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