磷脂酶C-γ1在大鼠發(fā)育過程中的mRNA表達(dá)及其前體mRNA剪接的初步探討.pdf

1、該實驗首先以大鼠為研究模型,利用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測及分析大鼠在胚胎時期、出生后早期、成年時期各重要臟器PLCG1在mRNA水平上的時空表達(dá)變化,探討PLC-γ 1在轉(zhuǎn)錄水平對大鼠的生長發(fā)育過程的調(diào)控作用的影響.同時,采用RT-PCR、序列分析等方法對大鼠PLC-γ 1的前體mRNA的剪接方式做初步探討,為進(jìn)一步研究它們

2、在不同的組織、不同的生長發(fā)育階段中的表達(dá)及其功能機(jī)制奠定工作基礎(chǔ).結(jié)論:一、在大鼠不同的發(fā)育及生長階段包括胚胎時期、出生早期、成年時期,肝、肺、腎、腦四種重要臟器組織中,PLCG1在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)均較強(qiáng);并且各時期之間的表達(dá)有顯著性差異;而在同一時期4種不同的組織間PLCG1的表達(dá)也有顯著性差異.因此,同一臟器組織在不同的發(fā)育時期及在同一時期不同臟器組織之間的PLCG1的差異性表達(dá)提示了通過對轉(zhuǎn)錄水平mRNA表達(dá)量的影響及mRNA穩(wěn)定性

3、的調(diào)節(jié),PLCG1的基因表達(dá)調(diào)控過程對大鼠生長發(fā)育過程中細(xì)胞的增殖與分化起著重要作用.二、從現(xiàn)有已分析的21份樣品中尚未發(fā)現(xiàn)與人類相似的第一種剪接方式(PLC-γ 1a),這一實驗結(jié)果表明:(1)導(dǎo)致這一結(jié)果可能因樣品涵蓋量不夠;(2)如果存在兩種剪接,其中一種表達(dá)占優(yōu)勢,而另一種只是微量表達(dá),在PCR時表達(dá)占優(yōu)勢的剪接體擴(kuò)增占優(yōu),從而可能導(dǎo)致假陰性;(3)由于不同物種之間的差異,在大鼠中可能不存在與人類已發(fā)現(xiàn)的PLC-γ 1前體mRN