布魯氏菌病、萊姆病膠體金診斷方法的建立與應(yīng)用.pdf

1、布魯氏菌病嚴(yán)重危害著人類的健康和畜牧業(yè)的快速發(fā)展，它是一種動物源性、自然疫源性人獸共患病。萊姆病是一種人獸共患傳染性疾病，是由蜱傳播的若干個不同基因種的伯氏疏螺旋體引起的疾病。
　　目的：（1）本研究基于血清學(xué)診斷方法，建立一種快速、便捷的適用于基層診斷布魯氏菌的免疫膠體金試紙條檢測方法。（2）本研究應(yīng)用免疫滲濾技術(shù)，建立一種早期鑒別萊姆病的快速診斷方法。
　　方法：（1）提取純化羊種布魯氏菌強毒株16M LPS，對其純度、

2、濃度進(jìn)行鑒定后，以LPS作為包被抗原，優(yōu)化完善膠體金免疫層析技術(shù)以及試紙條的制作條件，完成試紙條的組裝后，對不同動物、人類血清樣品進(jìn)行檢測，并與虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗結(jié)果進(jìn)行對比，分析以16M LPS作為包被抗原的試紙條的可行性。（2）使用石河子大學(xué)人獸共患病實驗室構(gòu)建的萊姆重組蛋白BmpA，經(jīng)過純化、濃縮，達(dá)到最佳包被濃度后，優(yōu)化免疫滲濾技術(shù)的條件，使用免疫滲濾技術(shù)對疑似萊姆患者血清及未知綿羊血清進(jìn)行檢測，通過檢測結(jié)果，探究萊

3、姆膜脂蛋白 BmpA作為包被抗原應(yīng)用免疫滲濾技術(shù)，對萊姆病診斷的可行性。
　　結(jié)果：（1）免疫膠體金試紙條 LPS最佳包被濃度為2.0 mg/mL。440份血清樣品檢測結(jié)果為：試紙條與試管凝集試驗的符合率為95.45％，明顯高于虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗的符合率（79.55%）；且試紙條的陽性檢出率為84.32%，試管凝集試驗陽性檢出率為86.59%，相差較小。（2）重組蛋白 BmpA以2.0 mg/mL為制作免疫滲濾卡盒的最