水牛伊氏錐蟲病免疫膠體金試紙條的研制及初步應(yīng)用.pdf

1、錸米縣／J大了UDC$85823密級(jí)碩士學(xué)位論文水牛伊氏錐蟲病免疫膠體金試紙條的研制及初步應(yīng)用孟盟學(xué)科專業(yè)亟隨獸醫(yī)堂指導(dǎo)教師陵這空數(shù)援論文答辯日期2Q!羔生墨旦旦學(xué)位授予日期2Q!羔生魚旦答辯委員會(huì)主席毖鴻邀圭堡醫(yī)垣論文評(píng)閱人鄞建圓』巫塞旦王空田副嬰塞旦＼歹霸譬飛飛怦水牛伊氏錐蟲病免疫膠體金試紙條的研制及初步應(yīng)用I“fl孵，l伊摘要伊氏錐蟲隸屬于原生動(dòng)物門，鞭毛蟲綱，動(dòng)基體目，錐蟲科，錐蟲屬。能引起動(dòng)物的急性死亡或隱性感染，造成貧血、進(jìn)

2、行性消瘦、死胎、流產(chǎn)、泌乳減少等n3，對(duì)畜牧業(yè)特別是水牛養(yǎng)殖業(yè)造成很大的損失瞳1。目前用于伊氏錐蟲的免疫學(xué)診斷方法有ELISA、間接免疫熒光抗體試驗(yàn)和間接血凝試驗(yàn)等，但這些技術(shù)檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)或需要特殊儀器設(shè)備等，不適合在基層推廣應(yīng)用。免疫膠體金技術(shù)開始于20世紀(jì)80年代，在人類疾病的診斷中已得到廣泛應(yīng)用，該法具有操作簡(jiǎn)便，出結(jié)果快，靈敏特異，7檢測(cè)受外界因素影響較小，安全簡(jiǎn)便，不需任何儀器和設(shè)備，成本低廉，所需試劑和樣本量少等優(yōu)點(diǎn)。適合于基

3、層大面積普查和大批量時(shí)間緊的檢測(cè)等。本研究采用檸檬酸鈉還原法制備膠體金顆粒，標(biāo)記純化的抗伊氏錐蟲VSG抗原的OB6單克隆抗體，在硝酸纖維素膜上涂加純化的抗伊氏錐蟲VSG抗原的TB7單克隆抗體和兔抗小鼠IgC二抗，作為檢測(cè)帶和質(zhì)控帶，然后優(yōu)化條件，研制成檢測(cè)伊氏錐蟲病的免疫膠體金試紙條。通過交叉試驗(yàn)表明該試紙條與衣原體、弓形蟲、旋毛蟲、巴貝斯焦蟲和大片吸蟲無交叉反應(yīng)。該試紙條最低可以檢出1：3200倍稀釋的伊氏錐蟲VSG抗原(濃度為31l