氫生理鹽水對大鼠肝大部切除后小肝綜合征的保護作用及機制研究.pdf

1、研究方法
　　 1.90％肝切除模型制備：根據(jù)Martins等方法進行改良。本實驗中，乙醚麻醉，取上腹部正中切口，用絲線分別結(jié)扎肝左葉、中葉、右下葉及右上葉，并予90％肝切除，觀察剩下的尾狀葉無淤血后關(guān)腹。
　　 2.實驗分組及處理：大鼠被隨機分成三組：A組(n=60)、B組(n=40)、C組(n=40)。A組大鼠用于觀察5天牛存期，B和C組大鼠分別于術(shù)后2小時和24小時處死。根據(jù)不同的處理，A、B、C三組又分別分四個小

2、組：A1、B1、C1(假手術(shù))，A2、B2、C2(90％肝切除+5ml/kg生理鹽水)，A3、B3、C3(90％肝切除+5ml/kg氫生理鹽水)，A4、B4、C4(90％肝切除+10ml/kg氫生理鹽水)。術(shù)畢和術(shù)后每8小時，大鼠腹腔注射氫生理鹽水(5或10ml/kg)或生理鹽水(5ml/kg)。
　　 3.處死大鼠由下腔靜脈取血5ml靜置析取血清和液氮冰凍肝組織留待檢測：全自動生化分析儀測定大鼠血清TBIL、DBIL、ALT、

3、AST含量；通過特定的化學方法測定大鼠肝組織中的丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)；ELISA法測定大鼠肝組織中促炎因子TNF-a、IL-6和HMGB-1的濃度；通過放射測量法測定血清中透明質(zhì)酸(HA)的含量；大鼠肝組織病理切片H&E染色觀察肝細胞損傷，以及CD31/PECAM-1抗體染色和NF-κBp65抗體染色分別觀察內(nèi)皮細胞的損傷和抗炎作用。
　　 實驗結(jié)果
　　 1.90％肝切除后，對照組大鼠的5天生存期

4、為20％，氫生理鹽水組(HS，5mg/kg和10mg/kg)分別是53.3％和60％。這些數(shù)據(jù)表明HS可以明顯延長肝大部切除后小肝綜合征引起肝衰的大鼠生存期。
　　 2.90％大鼠肝切除后，血清TBIL、DBIL、ALT和AST顯著升高，HS可以明顯降低血清中TBIL、DBIL、ALT和AST的水平，減輕肝細胞的損傷；HS顯著降低血清中透明質(zhì)酸的含量，減輕內(nèi)皮細胞的損傷。
　　 3.HS顯著降低肝組織中的丙二醛(MDA)