康萊特對UVB照射后人皮膚成纖細胞MMP1，MMP3的表達影響.pdf

1、目的：本研究通過觀察中藥薏苡仁提取物康萊特(KLT)對中波紫外線(ultravioletB，UVB)照射的體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞的基質(zhì)金屬蛋白酶1、3(MatrixMetallo Proteinases，MMP1、MMP3)mRNA及蛋白表達的影響，進一步探討康萊特(KLT)是否抗光老化的藥理作用。
　　方法：采用酶消化法和組織塊法培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞；MTT法檢測康萊特對人皮膚成纖維細胞增殖的影響；用不同輻照劑量UVB照射細胞

2、后用實時熒光定量技術(shù)(RT-PCR)檢測MMP1，MMP3 mRNA表達，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測MMP1，MMP3蛋白水平；30 mJ/cm2 UVB照射細胞后分組分別加入1、2.5、5μL/mL康萊特基質(zhì)及康萊特，用同上方法檢測MMP1，MMP3 mRNA及蛋白水平。
　　結(jié)果：人皮膚成纖維細胞倍增時間較短，0-1d為潛伏期，1-3 d為細胞增殖期，3-5 d為對數(shù)生長期而5-7 d為平臺期。第6代之后細胞逐漸失去

3、活力，生長緩慢，形態(tài)不規(guī)則。經(jīng)MTT法檢測加入不同濃度的康萊特細胞組結(jié)果顯示與未加康萊特組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。30 mJ/cm2 UVB照射細胞組的MMP1，MMP3 mRNA及蛋白表達水平與無UVB照射組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。30 mJ/cm2 UVB照射細胞組加入不同濃度基質(zhì)及康萊特MMP1，MMP3 mRNA及蛋白表達水平與對照組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
　　結(jié)論：人成纖維細胞可