康萊特對(duì)UVB照射后人皮膚成纖細(xì)胞MMP1，MMP3的表達(dá)影響.pdf

1、目的：本研究通過(guò)觀察中藥薏苡仁提取物康萊特(KLT)對(duì)中波紫外線(ultravioletB，UVB)照射的體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞的基質(zhì)金屬蛋白酶1、3(MatrixMetallo Proteinases，MMP1、MMP3)mRNA及蛋白表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討康萊特(KLT)是否抗光老化的藥理作用。
　　方法：采用酶消化法和組織塊法培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞；MTT法檢測(cè)康萊特對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖的影響；用不同輻照劑量UVB照射細(xì)胞

2、后用實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)(RT-PCR)檢測(cè)MMP1，MMP3 mRNA表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)MMP1，MMP3蛋白水平；30 mJ/cm2 UVB照射細(xì)胞后分組分別加入1、2.5、5μL/mL康萊特基質(zhì)及康萊特，用同上方法檢測(cè)MMP1，MMP3 mRNA及蛋白水平。
　　結(jié)果：人皮膚成纖維細(xì)胞倍增時(shí)間較短，0-1d為潛伏期，1-3 d為細(xì)胞增殖期，3-5 d為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期而5-7 d為平臺(tái)期。第6代之后細(xì)胞逐漸失去

3、活力，生長(zhǎng)緩慢，形態(tài)不規(guī)則。經(jīng)MTT法檢測(cè)加入不同濃度的康萊特細(xì)胞組結(jié)果顯示與未加康萊特組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。30 mJ/cm2 UVB照射細(xì)胞組的MMP1，MMP3 mRNA及蛋白表達(dá)水平與無(wú)UVB照射組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。30 mJ/cm2 UVB照射細(xì)胞組加入不同濃度基質(zhì)及康萊特MMP1，MMP3 mRNA及蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　結(jié)論：人成纖維細(xì)胞可