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文檔簡介
1、目的:熱量限制(Caloric restriction,CR)又稱為飲食限制(Dietaryrestriction,DR),是指在提供主要營養(yǎng)成分如必需氨基酸、維生素等,保證生物體基本營養(yǎng)需要的前提下,通過減少食物中攝入的脂肪或糖類以限制每日攝取的總熱量(一般是將正常自由進(jìn)食所得熱量減去30%~40%)。1935年美國康奈爾大學(xué)營養(yǎng)學(xué)家McCay等發(fā)現(xiàn)通過生長期限制熱量的攝入可以延長大鼠的壽命。目前,CR已成為醫(yī)學(xué)與生物學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)
2、。20世紀(jì)80年代,Weindruch等在CR的大鼠模型中,觀察了近300種與年齡老化有關(guān)的生理指標(biāo)變化,發(fā)現(xiàn)CR對其中絕大部分指標(biāo)的變化具有延緩作用,其中包括了行為、學(xué)習(xí)能力、基因表達(dá)、酶活性、免疫功能等多個方面。亦有研究顯示CR可以延緩免疫功能的衰退而起到延緩衰老的作用。Walford(1974)根據(jù)CR延長壽命是由于延緩免疫衰退而起作用的假說,首先經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí),CR能使小鼠免疫系統(tǒng)的成熟延遲,免疫衰退延緩。姜黃在我國作為藥用已有10
3、00多年的歷史,姜黃的主要有效成分是姜黃素,我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為它具有活血化瘀、行氣止痛的功效,近年研究結(jié)果表明姜黃還顯示出較強(qiáng)的抗炎、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等活性。免疫球蛋白是機(jī)體抗感染的重要屏障,在人體的免疫功能中發(fā)揮著重要作用,IgA、IgG、IgM是其最主要的成分。本實(shí)驗(yàn)研究通過檢測成年SD大鼠不同熱量及加入中藥姜黃飼料喂養(yǎng)后3個月,血清及脾臟組織勻漿中免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平及免疫器官指數(shù)的變化,以探討CR及姜黃對大鼠免疫功
4、能的影響。
方法:選取清潔級健康雄性成年SD大鼠46只,隨機(jī)分為4組:Ⅰ組(普通飼料組,即對照組)12只、Ⅱ組(高熱量組)12只、Ⅲ組(限制熱量組,即CR組)12只及Ⅳ組(高熱量+姜黃組)10只。實(shí)驗(yàn)初各組之間體重比較無顯著性差異。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到90天時,在10%水合氯醛麻醉下,經(jīng)下腔靜脈采血留取標(biāo)本后經(jīng)股動脈放血處死。剖腹取脾臟,經(jīng)冰生理鹽水沖洗,濾紙吸干后,進(jìn)行稱重,計(jì)算脾指數(shù),即免疫器官指數(shù)。取脾臟組織制備成10%組織勻
5、漿,以2400轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,提取上清液;取靜脈血標(biāo)本以2000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,提取血清,分別采用放射免疫法檢測IgA、IgG含量,采用酶聯(lián)免疫法檢測IgM含量。應(yīng)用The SASSystem for Windows V8統(tǒng)計(jì)軟件建立數(shù)據(jù)庫,對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,多組間均數(shù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)和單因素方差分析;兩組間比較采用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn),以α=0.05作為差異顯著性水準(zhǔn),p<
6、0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:①大鼠體重變化:飼養(yǎng)前各組大鼠的體重滿足方差齊性,各組間體重?zé)o顯著性差異(p>0.05)。飼養(yǎng)30天后,與對照組相比,Ⅱ組體重增長顯著,Ⅲ組、Ⅳ組體重增長緩慢,差異均具有顯著性(p<0.001);飼養(yǎng)60天后,與對照組相比,Ⅱ組體重增加,但無顯著性差異(p>0.05),Ⅲ組、Ⅳ組體重增長緩慢,均具有顯著性差異(p<0.001);飼養(yǎng)90天后,與對照組相比,Ⅱ組體重增加,但無顯著性差異(p>0
7、.05),Ⅲ組、Ⅳ組體重增長緩慢,具有顯著性差異(p<0.001)。②各組大鼠血清免疫球蛋白水平比較:與對照組比較,Ⅱ組大鼠血清IgA、IgG、IgM含量增加不明顯(p>0.05);Ⅲ組大鼠血清Igh含量顯著增加(p<0.05),血清IgG、IgM含量雖大多有所增加,但無顯著性差異(p>0.05);Ⅳ組大鼠血清IgA、IgM含量無明顯變化(p>0.05),而血清IgG含量明顯升高(p<0.05)。與Ⅲ組相比:Ⅱ組血清IgA、IgG、Ig
8、M含量變化不明顯(p>0.05);Ⅳ組血清IgA含量普遍降低(p<0.05),IgG含量明顯增加(p<0.05)血清IgM含量無明顯變化(p>0.05)。Ⅳ組與Ⅱ組相比,血清IgA含量降低(p<0.05),IgG含量無明顯變化(p>0.05),IgM含量顯著性增加(p<0.05)。③各組大鼠脾組織勻漿中免疫球蛋白水平比較:與對照組比較,Ⅱ組脾組織勻漿IgA、IgG、IgM含量增加不明顯,差異均無顯著性(p>0.05);Ⅲ組大鼠脾組織勻漿
9、IgA、IgG含量雖有所升高,但無顯著性差異(p>0.05),IgM含量則明顯升高(p<0.05);Ⅳ組大鼠脾組織勻漿IgA、IgM含量變化不明顯(p>0.05),而IgG含量顯著增加(p<0.05)。與Ⅲ組相比:Ⅱ組脾組織勻漿IgA含量明顯增加(p<0.05),IgM含量顯著降低(p<0.05),IgG含量變化不明顯(p>0.05);Ⅳ組脾組織勻漿IgA含量無明顯變化(p>0.05),IgG含量增加(p<0.05),IgM含量降低(p
10、<0.05)。Ⅳ組與Ⅱ組相比,脾組織勻漿IgA、IgG、IgM含量均無顯著變化(p>0.05)。④各組免疫器官指數(shù)比較:與對照組相比,Ⅱ組大鼠免疫器官指數(shù)變化不明顯(p>0.05);Ⅲ組大鼠免疫器官指數(shù)普遍升高(p<0.05);Ⅳ組大鼠免疫器官指數(shù)升高較明顯(p<0.05)。與Ⅲ組比較,Ⅱ組免疫器官指數(shù)顯著降低(p<0.05),Ⅳ組大鼠免疫器官指數(shù)無明顯變化(p>0.05)。Ⅳ組與Ⅱ組比較,免疫器官指數(shù)明顯升高(p<0.05)。
11、 結(jié)論:①通過熱量限制,能夠明顯提高大鼠血清IgA含量,而lgG與IgM含量雖有所增加,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②通過熱量限制,亦能使脾組織勻漿中IgM含量明顯增加,而IgA與IgG含量增加不明顯。③熱量限制能夠顯著提高大鼠的免疫器官指數(shù)。④通過在高熱量飲食中加入姜黃可明顯提高大鼠血清及脾組織勻漿中IgG含量及免疫器官指數(shù),而對IgA、IgM影響不明顯。⑤高熱量組血清IgA含量明顯高于高熱量+姜黃組,脾組織勻漿IgA含量明顯高于熱量限
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