一種生長(zhǎng)抑素基因免疫的新策略研究.pdf

1、生長(zhǎng)抑素是由下丘腦分泌的一種神經(jīng)多肽,能抑制GH釋放進(jìn)而抑制動(dòng)物生長(zhǎng)。DNA疫苗由于能同時(shí)誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)成為研究者關(guān)注的焦點(diǎn)之一,但單獨(dú)使用DNA疫苗在大動(dòng)物或人體誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)效果不理想,必須改善現(xiàn)有免疫方式來增強(qiáng)其免疫原性,如基因槍的使用或佐劑的開發(fā)利用。基因槍盡管有其高效性,但所需裝置昂貴,應(yīng)用成本較高,因而限制其應(yīng)用。佐劑的使用是比較理想的方式,但其大都需要特殊處理,符合特定標(biāo)準(zhǔn),并同DNA疫

2、苗混合后方可應(yīng)用。另外,DNA疫苗也必須從工程菌中大量抽提出來,費(fèi)時(shí)費(fèi)力,這勢(shì)必影響了實(shí)驗(yàn)的可操作性,也使實(shí)驗(yàn)的成本加大,不利于推廣。因此,開發(fā)新型免疫策略已成為亟待解決的問題。
　　 本研究對(duì)一種生長(zhǎng)抑素基因免疫的新方法進(jìn)行了評(píng)估,即用含目的質(zhì)粒的滅活菌體直接免疫(不用抽提質(zhì)粒)來取代現(xiàn)行的質(zhì)粒DNA免疫方法(質(zhì)粒)。以純質(zhì)粒免疫組為參照組,同用滅活菌體免疫組進(jìn)行比較,引用四個(gè)參數(shù)分別從不同的角度來評(píng)估,包括抗生長(zhǎng)抑素抗體檢測(cè)

3、、生長(zhǎng)測(cè)定、細(xì)胞免疫檢測(cè)、臟器指數(shù)檢測(cè)。
　　 1抗生長(zhǎng)抑素抗體檢測(cè)
　　 滅活菌體免疫組,在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)時(shí)期,抗體P/N值均極顯著高于質(zhì)粒組(P<0.01)。在實(shí)驗(yàn)期,滅活菌體組的陽性鼠比例亦均顯著高于純質(zhì)粒組,最大P/N值也出現(xiàn)在此組。并且滅活菌體組也使機(jī)體產(chǎn)生有效的免疫記憶或長(zhǎng)期的免疫力。
　　 2生長(zhǎng)測(cè)定即增重檢測(cè)
　　 在增重實(shí)驗(yàn)中,滅活菌體組免疫亦表現(xiàn)出比純質(zhì)粒組的優(yōu)勢(shì)。加免兩周時(shí),滅活菌體組增

4、重極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),顯著高于純質(zhì)粒組(P<0.05)。加免四周后,兩實(shí)驗(yàn)組增重極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),滅活菌體組增重極顯著高于純質(zhì)粒組(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),兩實(shí)驗(yàn)組之間差異不顯著(P>0.05),但滅活菌體組增重高于純質(zhì)粒組。
　　 3細(xì)胞免疫檢測(cè)
　　 細(xì)胞免疫方面,進(jìn)行了T細(xì)胞增殖和DTH兩個(gè)實(shí)驗(yàn)。在T細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中,純質(zhì)粒免疫組和滅活菌體免疫組在誘導(dǎo)SS的特異性淋巴細(xì)胞增殖方面效果

5、相似,二者差異不顯著(P>0.05),但都優(yōu)于各自對(duì)照組。DTH實(shí)驗(yàn)中無論是純質(zhì)粒組,還是滅活菌體組,左腳掌厚度與右腳掌厚度的比值P/N均大于1.0,且在第48h時(shí)比值達(dá)到高峰,但滅活菌體組和純質(zhì)粒組小鼠P/N之間差異不顯著(P>0.05)。
　　 4臟器指數(shù)檢測(cè)
　　 臟器指數(shù)是重要的生物學(xué)指標(biāo)之一。滅活菌體免疫組同對(duì)照組在心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、脾臟脾臟、肺臟指數(shù)上差異不顯著(P>0.05),表明新免疫方法并不