青蒿琥酯與克林霉素聯(lián)用延緩惡性瘧抗藥性的實驗研究.pdf

1、1.目的 1．1觀察實驗組（青蒿琥酯與克林霉素聯(lián)合用藥）與對照組（單一用青蒿琥酯）在延緩惡性瘧原蟲對青蒿素類藥物抗藥性方面的作用，為瘧疾臨床治療用藥及抗瘧藥的研發(fā)提供參考。 1．2體外測定不同階段實驗組與對照組惡性瘧原蟲對青蒿琥酯的敏感性，計算半數(shù)抑制量（ID50）。 1．3對不同階段實驗組與對照組惡性瘧原蟲對青蒿琥酯的敏感性（ID50）進行對比研究。 1．4探討聯(lián)合用藥是否有增效和延緩惡性瘧原蟲抗性的作

2、用，為瘧疾的臨床治療提出新的聯(lián)用方案。 2.方法 2．1蟲株與培養(yǎng)：惡性瘧原蟲抗青蒿琥酯株（品系），參照Trager等方法進行體外連續(xù)培養(yǎng)。 2．2藥物作用觀察：用體外劑量遞增間隔接觸法進行抗性培育。 2．3體外測定：測試采用Rieckmann體外微量測定法。以測定板的對照#為基數(shù)，計算各濃度#中的裂殖體抑制率，用ICEstimator software計算ID50。 2．4判別標(biāo)準(zhǔn) 惡性

3、瘧原蟲對青蒿琥酯的ID50較親代上升5倍以上，可以認(rèn)為對該藥產(chǎn)生了抗藥性，相應(yīng)的惡性瘧原蟲稱為惡性瘧原蟲青蒿琥酯抗性株。在相同的搞性培育時間內(nèi)，青蒿琥酯/克林霉素對惡性瘧原蟲的ID50分別較親代上升5倍，可以認(rèn)為對該藥產(chǎn)生了抗性；青蒿琥酯/克林霉素對惡性瘧原蟲的ID50分別與親代相比，無明顯上升或者雖然有上升，但明顯低于對照組，可以認(rèn)為該聯(lián)合用藥有延緩作用。 3.結(jié)果 3．1對照組惡性瘧原蟲接觸青蒿琥酯前后的敏感性測定結(jié)

4、果 對照組瘧原蟲在接觸青蒿琥酯后90天對青蒿琥酯的ID50為接觸藥物前的19．0（273．8/14．4）倍，停藥后30天的1．8（273．8/155．8）倍，停藥后30天的ID50為接觸藥物前的10．8（155．8/14．4）倍；對克林霉素的ID50為接觸藥物前的1．7（24815．2/14610．4）倍，停藥后30天的1．2（24815．2/21543．2）倍，停藥后30天的ID50為接觸藥物前的1．5（21543．2/146

5、10．4）倍。 3．2實驗組惡性瘧原蟲接觸青蒿琥酯/克林霉素前后的敏感性測定結(jié)果惡性瘧原蟲在接觸青蒿琥酯/克林霉素后90天，對青蒿琥酯的ID50為接觸藥物前的3．4（49．6/14．4）倍，停藥后30天的1．6（49．6/30．2）倍，停藥后30天的ID50為接觸藥物前的2．1（30．2/14．4）倍。對克林霉素的ID50為接觸藥物前的1．6（23859．4/14610．4）倍，停藥后30天的1．5（23859．4/15487．

6、4）倍，停藥后30天的ID50為接觸藥物前的1．1（15487．4/14610．4）倍。 3．3青蒿琥酯/克林霉素聯(lián)用與青蒿琥酯單用對惡性瘧原蟲作用的比較在惡性瘧原蟲未接觸藥物前，在青蒿琥酯測定板、克林霉素測定板和青蒿琥酯/克林霉素復(fù)合測定板中測定瘧原蟲的敏感性顯示，單一測定板中青蒿琥酯的ID50是復(fù)合測定板的2．3（14．4/6．4）倍；克林霉素的ID50是復(fù)合測定板的143．5（14610．4/101．8）倍。照組在接觸藥物

7、90天后，單一測定板中青蒿琥酯的ID50是復(fù)合測定板的5．5（273．80/50．2）倍；克林霉素的ID50是復(fù)合測定板的30．9（24815．2/803．2）倍。實驗組在接觸藥物90天后，單一測定板中青蒿琥酯的ID50是復(fù)合測定板的0．5（49．6/99）倍；克林霉素的ID50是復(fù)合測定板的15．1（23859．40/1584．8）倍。 4.結(jié)論 4．1惡性瘧原蟲在單一接觸青蒿琥酯后一段時間可產(chǎn)生抗藥性，其ID50遠遠