激活的CIK細(xì)胞基因表達(dá)譜研究.pdf

1、目的：觀察負(fù)載抗原的DC細(xì)胞對(duì)CIK殺傷活性的作用及DC細(xì)胞誘導(dǎo)的CIK基因表達(dá)譜的變化。 方法：以人PBMC制備DC細(xì)胞和CIK細(xì)胞。DC細(xì)胞的制備方法是將貼壁細(xì)胞混懸于10％FBS RPMI 1640培養(yǎng)液(含IL-4和GM-CSF)，于37℃5％CO2孵育箱中培養(yǎng)7天。CIK細(xì)胞是將非貼壁細(xì)胞混懸于10％FBS RPMI 1640(含INF-γ)，培養(yǎng)24小時(shí)后，補(bǔ)加IL-2、IL-1a、鼠抗人CD3單抗，繼續(xù)培養(yǎng)7或14

2、天。用流式細(xì)胞術(shù)分析DC細(xì)胞和CIK細(xì)胞的表型。以混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)測(cè)定DC細(xì)胞活性，以體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)測(cè)定DC激活的CIK細(xì)胞的殺傷活性。利用基因芯片技術(shù)檢測(cè)它們?cè)卺尫畔嚓P(guān)細(xì)胞因子水平及信號(hào)傳導(dǎo)通路所發(fā)生的一系列變化。 結(jié)果：表型分析顯示本實(shí)驗(yàn)制備的CIK細(xì)胞中主要是CD3<'+>CD56<'+>NKT細(xì)胞，增殖能力較強(qiáng)；DC細(xì)胞表達(dá)高水平的CD40、CD80、CD86和HLA-DR，可誘導(dǎo)混合淋巴反應(yīng)。未負(fù)載抗原的DC細(xì)胞和抗

3、原負(fù)載的DC細(xì)胞均可刺激CIK細(xì)胞的增殖，二者之間無(wú)顯著性差別。但未負(fù)載抗原的DC細(xì)胞不能顯著地進(jìn)一步增強(qiáng)CIK細(xì)胞的殺傷活性。抗原負(fù)載的DC細(xì)胞能顯著增強(qiáng)CIK細(xì)胞特異性殺傷靶細(xì)胞的能力。芯片掃描發(fā)現(xiàn)：50種信號(hào)傳導(dǎo)因子發(fā)生5倍以上的改變。 結(jié)論：抗原負(fù)載的DC細(xì)胞可活化CIK細(xì)胞，并使其具有特異性殺傷腫瘤細(xì)胞的能力。DC激活的CIK細(xì)胞基因表達(dá)譜的變化主要見(jiàn)于Cys-cys、MIP-2a、IFN調(diào)節(jié)因子-1、IFN拮抗性細(xì)胞