載脂蛋白E基因敲除及高脂飲食小鼠海馬神經(jīng)元內(nèi)IP3、IP3R-1和Aβ表達(dá)變化的研究.pdf

1、目的：觀察載脂蛋白E(ApoE)基因敲除(KO)及高脂飲食小鼠海馬CA1和CA3區(qū)神經(jīng)元內(nèi)三磷酸肌醇(inositol1,4,5-triphosphate,IP3)、三磷酸肌醇受體Ⅰ型(inositol1,4,5-triphosphate receptor-1,IP3R-1)和β淀粉樣蛋白(amyloid proteinβ,Aβ)表達(dá)的變化,以探討小鼠ApoE基因敲除及高脂飲食與神經(jīng)退行性疾病發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。方法：將30只C57BL/6

2、J小鼠分為對照組(C組)、ApoE KO組(KO組)和ApoE KO高脂飲食組(KO-HF組),小鼠成模后,稱重;取血檢測血脂;取小鼠腦組織分別進(jìn)行HE染色、免疫組織化學(xué)染色和計(jì)算機(jī)圖像分析。結(jié)果：①體重結(jié)果:C組小鼠體重(14.816±1.370)、KO組小鼠體重(20.066±1.821)及KO-HF組小鼠體重(23.631±5.215)存在差異(F=18.210,P＜0.05)。②血清學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果:C組小鼠總膽固醇(2.062±

3、0.303)、KO組小鼠總膽固醇(13.680±3.719)及KO-HF組小鼠總膽固醇(31.821±2.933)存在差異(F=279.439,P＜0.05);C組小鼠甘油三酯(1.778±0.397)、KO組小鼠甘油三酯(2.624±0.654)及KO-HF組小鼠甘油三酯(3.006±0.238)存在差異(F=18.422,P＜0.05);C組小鼠低密度脂蛋白(0.697±0.550)、KO組小鼠低密度脂蛋白(2.367±0.571)

4、及KO-HF組小鼠低密度脂蛋白(5.165±1.071)存在差異(F=73.820,P＜0.05)。③HE染色顯示,C組小鼠海馬CA1和CA3區(qū)錐體細(xì)胞層神經(jīng)元排列整齊、緊密,胞體呈錐體形或圓球形,胞核大而圓;KO組小鼠海馬錐體細(xì)胞層神經(jīng)元排列不整齊,胞體略小;KO-HF組小鼠海馬錐體細(xì)胞層神經(jīng)元排列松散稀疏,胞體小。④免疫組織化學(xué)染色顯示, IP3和 IP3R-1的免疫陽性物質(zhì)分布于小鼠海馬各區(qū)神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi),細(xì)胞核為陰性反應(yīng)。C組小鼠

5、海馬CA1和CA3區(qū)神經(jīng)元內(nèi)IP3和IP3R-1免疫陽性物質(zhì)著色呈棕黃色至棕褐色,KO組小鼠海馬神經(jīng)元著色呈淺黃色至棕黃色,KO-HF組小鼠海馬神經(jīng)元呈淺黃色。C組小鼠海馬CA1和CA3區(qū)Aβ表達(dá)于神經(jīng)元胞質(zhì)中,呈淡黃色,KO組小鼠神經(jīng)元內(nèi)Aβ染色呈淺棕黃色,KO-HF組小鼠神經(jīng)元內(nèi)的Aβ染色呈深棕黃色。⑤計(jì)算機(jī)圖像分析結(jié)果顯示,C組小鼠海馬CA1和CA3區(qū)神經(jīng)元內(nèi)的IP3平均光密度值分別為(0.394±0.025)和(0.393±0.

6、031)、KO組IP3平均光密度值分別為(0.375±0.045)和(0.375±0.045)及KO-HF組IP3平均光密度值分別為(0.341±0.033)和(0.343±0.0321),組間存在差異(P＜0.05);C組小鼠海馬CA1和CA3區(qū)神經(jīng)元內(nèi)的IP3R-1平均光密度值分別為(0.383±0.044)和(0.381±0.0503)、KO組IP3R-1平均光密度值分別為(0.364±0.044)和(0.370±0.0423)及

7、KO-HF IP3R-1平均光密度值分別為(0.338±0.013)和(0.338±0.012),組間存在差異(P＜0.05);C組小鼠海馬CA1和CA3區(qū)神經(jīng)元內(nèi)的Aβ平均光密度值(0.2865±0.011)和(0.2679±0.009)、KO組Aβ平均光密度值分別為(0.3354±0.032)和(0.3162±0.033)及KO-HF組Aβ平均光密度值分別為(0.3479±0.052)和(0.3299±0.035),組間存在差異(P