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文檔簡(jiǎn)介
1、鵝副粘病毒病又稱鵝源新城疫,是由鵝副粘病毒(Goose Paramyxovirus,GPMV)引起的一種急性、烈性傳染病。該病以鵝消化道和呼吸道病變?yōu)橹饕卣?,具有高度的發(fā)病率和死亡率,給養(yǎng)鵝業(yè)帶來了嚴(yán)重的危害。由于目前我國(guó)對(duì)鵝副粘病毒病的危害性缺乏足夠重視,尚缺乏完善的疾病診斷、監(jiān)測(cè)技術(shù)。面對(duì)該病在我國(guó)有逐步擴(kuò)大的趨勢(shì),開展鵝副粘病毒病的診斷和檢測(cè)技術(shù)的研究迫在眉睫。在血清學(xué)的臨床檢測(cè)方面,目前已經(jīng)有多次關(guān)于雞新城疫ELISA與HI檢
2、測(cè)比較的報(bào)道,然而對(duì)于鵝副粘病毒病卻未見這方面的報(bào)導(dǎo)。本研究以NP蛋白為檢測(cè)抗原對(duì)鵝副粘病毒病進(jìn)行了ELISA與HI檢測(cè)抗體相關(guān)性的比較。 GPMV屬于副粘病毒科,副粘病毒亞科,腮腺炎病毒屬,禽副粘病毒(Avian ParamyxovimsAPMV)Ⅰ型中的成員,具有基因Ⅶ型新城疫(NDV)的典型特征。NP蛋白是鵝副粘病毒核衣殼的主要結(jié)構(gòu)蛋白,在自然感染或者疫苗免疫后的動(dòng)物中都可以產(chǎn)生針對(duì)NP蛋白的抗體,具有重要的診斷價(jià)值。本研
3、究通過原核表達(dá)載體pET-30a,成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒pET-30a-NP,并通過大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)原核表達(dá)GPMV-NP蛋白。以純化的NP蛋白為包被抗原建立了ELISA檢測(cè)方法,通過對(duì)各個(gè)反應(yīng)條件的優(yōu)化,最終確定了最佳反應(yīng)條件。 本實(shí)驗(yàn)選取50只來源于肇東非疫區(qū)的鵝,隨機(jī)分為A、B、C、D 4組。A組為非免疫對(duì)照組;B組為免疫組;C組為免疫攻毒組;D組為人工感染組。分別在第一次免疫前、免疫后及攻毒后第1、2、3、4、5、6、7、8
4、、9、10、11、12、14、18周采血。對(duì)上述血清進(jìn)行ELISA定量檢測(cè)及HI抗體的檢測(cè)。比較各組鵝群NP蛋白ELISA抗體和HI抗體的相關(guān)性,分別建立了相關(guān)的回歸方程。免疫組:ELISA=0.1981 HI+0.054.1(r=0.9134,P<0.05);免疫攻毒組:ELISA=0.1807 HI-0.0744(r=0.8240,P<0.05);人工感染組:ELISA=0.2728 HI-0.4498(r=0.8795,P<0.0
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