神經(jīng)激肽NK1、NK3對(duì)基底前腦神經(jīng)元興奮性毒性損傷的不同調(diào)節(jié)作用.pdf

1、老年性癡呆（Alzheimer’s disease,AD）是常見的中樞神經(jīng)變性疾病，其確切的病因不清。研究發(fā)現(xiàn)，AD患者基底前腦膽堿能神經(jīng)元死亡明顯，興奮性毒性損傷是導(dǎo)致神經(jīng)元損傷與AD發(fā)病的重要因素。神經(jīng)激肽是包括P物質(zhì)(Neurokinin-1,NK1)、神經(jīng)激肽A(Neurokinin-2,NK2)、神經(jīng)激肽B(Neurokinin-3,NK3)的速激肽家族，其生物學(xué)效應(yīng)由相應(yīng)的NK1、NK2和NK3受體來介導(dǎo)。研究表明，神經(jīng)激肽

2、-神經(jīng)激肽受體在基底前腦膽堿能神經(jīng)元分布豐富，但其功能尚不清楚。 我們課題組以往的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)激肽在調(diào)節(jié)基底核紋狀體和黑質(zhì)神經(jīng)元興奮性毒性損傷中具有重要作用。進(jìn)一步探討神經(jīng)激肽對(duì)基底前腦膽堿能神經(jīng)元興奮性毒性的調(diào)節(jié)作用，對(duì)于揭示AD的病理發(fā)生機(jī)制和探索其治療策略，具有重要意義。 因此，本研究采用海人藻酸（kainic acid,KA）誘導(dǎo)興奮性毒性小鼠模型、分別給予NK1、NK3受體特異性激動(dòng)劑（septide、s

3、enktide），NK3受體拮抗劑(SB218795)干預(yù)方法、Fluoro-Jade B染色、免疫熒光雙標(biāo)記與激光共聚焦顯微鏡等技術(shù)，觀察分析了神經(jīng)激肽NK1、NK3對(duì)基底前腦神經(jīng)元興奮性毒性損傷和死亡的調(diào)節(jié)作用及其可能機(jī)制。 主要結(jié)果如下： 1.神經(jīng)激肽NK1、NK3 受體與離子型谷氨酸受體共存于基底前腦神經(jīng)元。細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果表明，約57-95％NK1 受體陽性神經(jīng)元表達(dá)AMPA 受體亞基GluR1、2、3、4，約14

4、％-77％NK3 受體陽性神經(jīng)元表達(dá)AMPA 受體亞基GluR1、2、3 和NMDA 受體亞基NR1。 2.神經(jīng)激肽NK1、NK3 對(duì)KA 注射誘導(dǎo)基底前腦神經(jīng)元興奮性毒性損傷產(chǎn)生不同的調(diào)節(jié)作用。NK1 受體激動(dòng)劑具有神經(jīng)保護(hù)作用，而NK3 受體激動(dòng)劑具有興奮性毒性的協(xié)同效應(yīng)。 結(jié)果表明：與KA 注射組相比，NK1 受體激動(dòng)劑septide 干預(yù)組的Fluoro-JadeB 陽性神經(jīng)元數(shù)量減少，ChAT 陽性神經(jīng)元存活率

5、增加（28％）。 而NK3 受體激動(dòng)劑senktide 處理組Fluoro-Jade B 陽性神經(jīng)元數(shù)目增多，ChAT 陽性神經(jīng)元存活率減少（22％）。NK3 受體拮抗劑SB218795 處理組Fluoro-Jade B 陽性神經(jīng)元降低，ChAT 陽性神經(jīng)元存活率增加（18％）。 3.應(yīng)用不同的雙標(biāo)記方法分析，幾乎全部（約100％）基底前腦死亡細(xì)胞為神經(jīng)元，F(xiàn)luoro-Jade B 染色神經(jīng)元數(shù)量與磷酸化NMDA 受體

6、上調(diào)和D-serine 陽性神經(jīng)元具有密切關(guān)系（正相關(guān)）。 初步結(jié)論： 1.神經(jīng)激肽NK1、NK3 受體和谷氨酸AMPA、NMDA 受體共存于基底前腦神經(jīng)元，提供了神經(jīng)激肽調(diào)節(jié)興奮性信號(hào)的受體學(xué)基礎(chǔ)。 2.神經(jīng)激肽NK1、NK3 對(duì)基底前腦神經(jīng)元興奮性毒性損傷具有不同的調(diào)節(jié)作用，其中NK1 具有神經(jīng)保護(hù)作用，而NK3 則具有興奮性神經(jīng)毒性的協(xié)同效應(yīng)。 本研究提供了神經(jīng)激肽NK1、NK3 調(diào)節(jié)基底前腦神經(jīng)元