紅斑狼瘡間質(zhì)干細胞(MSCs)異常及臍帶MSCs移植治療狼瘡鼠的實驗研究.pdf

1、目的： 1.探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者骨髓間質(zhì)干細胞（MSCs）的超微結(jié)構(gòu)及細胞骨架的形態(tài)學(xué)特征及探討臍帶間質(zhì)干細胞（UC-MSCs）對MRL/lpr狼瘡鼠的治療作用和可能機制。 方法： 體外培養(yǎng)SLE患者的MSCs后，透射電子顯微鏡（TEM）、激光共聚焦顯微鏡（LCM）觀察超微結(jié)構(gòu)及肌動蛋白、紐蛋白的表達；24只18周齡雌性MRL/lpr小鼠，分為3組：對照組（G1）、UC-MSCs1次治療組（G2）、U

2、C-MSCs3次治療組（G3）。觀察體重，考馬斯亮藍法檢測24h尿蛋白含量，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體水平、血清和尿液單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）水平，觀察腎臟、肺、頜下腺病理改變蛋白印跡法檢測腎臟MCP-1、高遷移率族蛋白B1（HMGB-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）和脾臟Foxp3蛋白水平的表達，實時定量PCR檢測腎臟MCP-1、HMGB-1、MMP-2 mRNA和脾臟Poxp3基

3、因表達，免疫組化檢測MCP-1以及HMGB-1、MMP-2在腎臟的表達。流式細胞儀檢測脾臟、淋巴結(jié)中CD4+CD25+Foxp3+T細胞百分率，TUNEL法檢測腎臟細胞的凋亡。 結(jié)果： SLE MSCs透射電子顯微鏡下多數(shù)細胞內(nèi)呈衰老征象，可見大量自噬體；細胞邊緣應(yīng)力纖維增多，排列紊亂，組成粗大的強熒光團，核周圍應(yīng)力纖維減少；紐蛋白在細胞邊緣排列紊亂，細胞核周圍增多；UC-MSCs移植后顯著降低MRL/lpr狼瘡鼠24

4、h尿蛋白定量、血肌酐，改善腎臟、肺、頜下腺病理。G1組抗ds-DNA抗體滴度較G3組顯著升高。HMGB-1mRNA表達量與血清抗ds-DNA抗體水平（r=0.469，P=0.021）及24h尿蛋白定量（r=0.766，P=0.000）相關(guān)。UC-MSCs移植能顯著降低MCP-1、HMGB-1、MMP-2在MRL/lpr狼瘡鼠腎臟的表達，上調(diào)脾臟CD4+Foxp3+T淋巴細胞的表達。UC-MSCs移植后系膜區(qū)細胞、腎小管間質(zhì)細胞、腎血管周