重樓皂苷的提取及其在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、重樓皂苷經(jīng)多年研究證明是重樓藥材的主要活性成分，其藥理作用顯著，然而其在體內(nèi)的代謝情況現(xiàn)今仍未見(jiàn)報(bào)道。本文探索了重樓皂苷提取物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征，以初步確定其代謝情況。主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　 ⑴重樓藥材的提取。以重樓皂苷Ⅰ和Ⅱ?yàn)槟繕?biāo)物，建立了重樓皂苷Ⅰ和Ⅱ含量測(cè)定的方法----標(biāo)準(zhǔn)曲線法?？疾焯崛》椒疤崛∪軇?duì)重樓皂苷百分含量的影響，進(jìn)而用正交試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行提取工藝的優(yōu)化。正交試驗(yàn)中采用三因素三水平正交表設(shè)計(jì)，以重樓皂苷

2、含量和收膏率為標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)方差分析和極差分析兩種方法確定最佳提取方案。最終確定重樓皂苷提取方法為20倍體積的40％乙醇超聲提取60min。
　　 ⑵重樓浸膏中有效成分的富集。本章同時(shí)采用正丁醇萃取法和大孔樹(shù)脂法進(jìn)行提純并比較其純化效果。其中，大孔樹(shù)脂法曾單純用到70％的乙醇進(jìn)行總皂苷的洗脫，但結(jié)果證明其洗脫能力并不理想。正丁醇萃取法雖然較之升高，但皂苷含量依然很低。因此，最終將純化方法確定為大孔樹(shù)脂吸附法，洗脫方法即純化水、60％

3、、80％乙醇分別5倍柱體積洗脫，收集80％乙醇洗脫的洗脫液，回收溶劑并減壓干燥得到重樓皂苷提取物。
　　 ⑶重樓皂苷藥代動(dòng)力學(xué)研究HPLC-MS/MS方法的建立。建立了重樓皂苷Ⅰ和Ⅱ血藥濃度測(cè)定的HPLC-MS/MS方法，此方法專(zhuān)屬性強(qiáng)，在規(guī)定條件下不受其他內(nèi)源性物質(zhì)干擾，靈敏性較高，血藥濃度的定量下限達(dá)18ng/ml，重樓皂苷Ⅰ在18.3～585 ng/ml范圍內(nèi)、重樓皂苷Ⅱ在18.6～596.7 ng/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好

4、，方法回收率、精密度、提取回收率、穩(wěn)定性考察都符合生物樣品分析的要求。
　　 ⑷大鼠尾靜脈注射重樓皂苷提取物的藥代動(dòng)力學(xué)研究。尾靜脈注射給予大鼠重樓皂苷提取物溶液，按照所建方法處理血漿樣品，測(cè)得不同時(shí)間點(diǎn)重樓皂苷的血藥濃度，將所測(cè)數(shù)據(jù)用軟件DAS2.0進(jìn)行擬合，得到主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明，重樓皂苷Ⅰ和Ⅱ均符合二室開(kāi)放藥代動(dòng)力學(xué)模型，兩者在血液內(nèi)的清除速度都很快。
　　 ⑸大鼠灌胃重樓皂苷提取物的藥代動(dòng)力學(xué)研究。灌胃