延胡索提取物在小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究.pdf

1、延胡索具有悠久的藥用歷史，具有活血，行氣，止痛的功能。生物堿是其主要的活性成分，除鎮(zhèn)痛外，還具有抗抑郁、抗腫瘤、抗菌、抗炎、抗氧化等多種藥理作用。許多含延胡索的制劑在臨床上已被用于治療頭痛、冠心病、胃腸炎、胃潰瘍等多種疾病，對其活性成分在體內(nèi)的血藥濃度和組織分布測定有利于藥物的合理使用。本研究建立了快速、靈敏、可同時定量14種生物堿——1個阿樸啡類:氧化海罌粟堿(OXO)，1個原阿片堿類:原阿片堿(PRO)，5個叔胺堿類:延胡索甲素(C

2、OR)、延胡索乙素(THP)、四氫小檗堿(4H-BER)、四氫非洲防己胺(4H-COL)、四氫黃連堿(4H-COP)和7個季銨堿類:非洲防己堿(COL)、巴馬汀(PAL)、小檗堿(BER)、表小檗堿(EPI)、黃連堿(COP)、藥根堿(JAR)、去氫延胡索甲素(DH-COR)的生物樣品HPLC-MS/MS分析方法，并應(yīng)用該方法對經(jīng)口服給予延胡索提取物后14種生物堿在小鼠血漿、腦、心臟、肝臟和腎臟藥代動力學(xué)特征進行了研究，主要結(jié)果如下:<

3、br>　　1.液質(zhì)聯(lián)用法測定小鼠血漿中14種生物堿的方法建立與藥代動力學(xué)研究
　　本研究建立并驗證了快速、靈敏、可同時定量14種生物堿在小鼠血漿中的HPLC-MS/MS分析方法。色譜柱為ZORBAX Eclipse XDB-C18(2.1×100mm，3.5μm)，流動相為乙腈（0.1％甲酸）—水（0.1％甲酸），流速為0.3mL/min進行梯度洗脫。以氯化兩面針堿作為內(nèi)標(biāo)，采用MRM模式檢測。按照中國藥典四部中的生物樣品定量分析

4、方法驗證指導(dǎo)原則（2015年版）和美國FDA生物分析方法驗證指導(dǎo)原則（2013年版）進行方法學(xué)驗證，符合限度規(guī)定。小鼠灌胃給予1.25g/kg延胡索提取物后于0～24h內(nèi)的不同時間點采集血漿樣本，并在本實驗條件下檢測，BER和EPI低于定量下限。通過比較12種生物堿的主要藥代動力學(xué)參數(shù)發(fā)現(xiàn)，延胡索提取物中的大多數(shù)生物堿能快速被吸收入血，THP在血中消除最快。
　　2.液質(zhì)聯(lián)用法測定小鼠4種組織中14種生物堿的方法建立與組織分布研究

5、本研究在小鼠血漿分析方法的基礎(chǔ)上，建立和驗證了快速、靈敏、可同時定量小鼠組織中14種生物堿的HPLC-MS/MS分析方法，樣品在不同的儲存條件下保持穩(wěn)定，驗證結(jié)果均在可接受水平。該分析方法成功應(yīng)用于小鼠灌胃1.25g/kg延胡索提取物后腦、心臟、肝臟、腎臟組織中14種生物堿的分布，并得出組織中藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明延胡索提取物中的大多數(shù)生物堿能迅速分布到4種組織中，所有生物堿在肝臟中的分布量最大。THP、 COP和PRO在腦組織中的分