瘤果黑種草子皂苷的提取純化及部分呼吸藥效研究.pdf

1、目的：對維藥瘤果黑種草子中皂苷進(jìn)行提取純化并對其在止咳、平喘、祛痰、抗炎方面的作用做初步研究。
　　方法：
　　1.采用試管系統(tǒng)預(yù)試法和專項(xiàng)檢查相結(jié)合對采自新疆和田地區(qū)的瘤果黑種草子進(jìn)行主要化學(xué)成分的定性分析；以常春藤皂苷元及齊墩果酸為標(biāo)準(zhǔn)品，高效液相色譜法測定瘤果黑種草子中皂苷的含量。
　　2.以瘤果黑種草子總皂苷量為考察指標(biāo)，采用紫外-可見分光光度法測定瘤果黑種草子總皂苷含量，以星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化瘤果黑種草子總

2、皂苷的提取工藝；考察 AB-8型大孔吸附樹脂純化瘤果黑種草子總皂苷的純化參數(shù)：上樣液濃度、上樣液pH、洗脫劑濃度、上樣液用量及洗脫速度，確定最佳純化工藝。
　　3.以濃氨水引咳法、噴霧致喘法、小鼠苯酚紅排泌法、二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致小鼠足趾腫脹法進(jìn)行止咳、平喘、祛痰、抗炎實(shí)驗(yàn)研究。觀察小鼠各指標(biāo)變化，闡述瘤果黑種草子總皂苷對小鼠止咳、平喘、祛痰、抗炎方面的影響。
　　結(jié)果：
　　1.瘤果黑種草子化學(xué)成分定性

3、實(shí)驗(yàn)證明，瘤果黑種草子主要包含揮發(fā)油、油脂、黃酮、生物堿、三萜皂苷、糖類、有機(jī)酸、氨基酸、多肽或蛋白質(zhì)等，建立了 HPLC法同時測定瘤果黑種草子中常春藤皂苷及齊墩果酸含量的反相高效液相色譜分析方法，常春藤皂苷元與齊墩果酸分別在22.76μg/mL~227.6μg/mL（r=0.9998），40.28μg/mL~201.4μg/mL（r=0.9997）范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率分別為94.6％、93.8%，平均總含量為4.76%。

4、r>　　2.確定瘤果黑種草子中皂苷最優(yōu)提取工藝為50%乙醇12倍量，60℃超聲提取90 min；最佳純化工藝為上樣液濃度為3.93mg/mL，8倍量50%乙醇，洗脫流速為4B V/h，按此條件提取純化得瘤果黑種草子總皂苷純度為62.1%。
　　3.通過研究表明：瘤果黑種草子中皂苷能明顯延長氨水引起的小鼠咳嗽潛伏期，并且高劑量組可顯著降低2min內(nèi)小鼠的咳嗽次數(shù)；高劑量組能明顯增加小鼠氣管酚紅排泌量；能明顯對抗二甲苯所致的小鼠耳廓腫