Pygo2對(duì)人OS-RC-2腎細(xì)胞癌作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]
　　探討Pygo2對(duì)人腎細(xì)胞癌OS-RC-2細(xì)胞系成瘤的影響,為體內(nèi)研究腎癌發(fā)病機(jī)制及靶向治療提供工具。
　　[方法]
　　采用人腎癌癌OS-RC-2細(xì)胞株,對(duì)其細(xì)胞中的Pygo2經(jīng)過(guò)一系列不同處理,然后分組建立裸鼠皮下移植瘤模型。MTT法觀察OS-RC-2細(xì)胞生長(zhǎng)情況。將裸鼠分成四組,每組四只,分別用處理過(guò)的四種腎癌細(xì)胞懸液,分別為A組:實(shí)驗(yàn)對(duì)照組GFP(原始細(xì)胞)、B組:空白對(duì)照組Pygo2scrRNA(

2、植入空白載體)、C組:過(guò)表達(dá)組Pygo2OE,D組:沉默組Pygo2shRNA(利用基因敲除技術(shù)使Pygo2低表達(dá))。將4.0x106腎細(xì)胞癌細(xì)胞懸液0.2ml種植于裸鼠右前腋窩下。定期觀察各組成瘤情況。免疫組化實(shí)驗(yàn)測(cè)定各組腫瘤組織的侵襲性蛋白(MMP-9、MMP-7和VEGF)表達(dá)。
　　[結(jié)果]
　　第2天細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。A、B、C組成瘤率均為100％,D組成瘤率為75%。Pygo2OE組于第3天可見(jiàn)黃豆粒大小移植瘤

3、,第7天,GFP和Pygo2scrRNA組觸及皮下小結(jié),Pygo2shRNA于第10才出現(xiàn)移植瘤。C組的成瘤速度明顯優(yōu)于其他三組(P﹤0.05)。D組的成瘤速度及成瘤率均低于其他組(P﹤0.05)。免疫組化實(shí)驗(yàn)研究表明Pygo2shRNA能夠顯著減少M(fèi)MP-7和VEGF的表達(dá),與減少M(fèi)MP-7和VEGF的表達(dá)量相比較,Pygo2shRNA不能明顯減少M(fèi)MP-9的表達(dá)量。
　　[結(jié)論]
　　使用OS-RC-2細(xì)胞株對(duì)其Pygo