白藜蘆醇降低人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞IL-6和VEGF分泌及其預(yù)處理上清抑制腫瘤細(xì)胞遷移.pdf

1、目的:本研究旨在探討白藜蘆醇（Resveratrol，RES）對(duì)人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord msenchymal stem cells，hucMSCs)分泌細(xì)胞因子的影響，以及白藜蘆醇預(yù)處理hucMSCs的條件培養(yǎng)基(RES-hucMSCs-CM)對(duì)腫瘤細(xì)胞形態(tài)、增殖、凋亡和遷移方面的作用及其機(jī)制。
　　方法:采用組織塊貼壁生長(zhǎng)的方法分離培養(yǎng)人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞(hucMSCs)，收集白藜蘆醇處理huc

2、MSCs的上清、蛋白及RNA，應(yīng)用ELISA、Luminex、Western blot、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、細(xì)胞免疫熒光等技術(shù)方法分析白藜蘆醇對(duì)hucMSCs的影響。通過ELISA技術(shù)檢測(cè)白藜蘆醇預(yù)處理hucMSCs的條件培養(yǎng)基(RES-hucMSCs-CM)中IL-6的變化。RES-hucMSCs-CM作用于腫瘤細(xì)胞（A549和H446），顯微鏡下觀察其形態(tài)變化，細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞的增殖，流式PI/AnnexinⅤ雙染法檢測(cè)細(xì)

3、胞的凋亡，Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移，Western blot檢測(cè)磷酸化STAT3(p-STAT3)、總STAT3(t-STAT3)的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:白藜蘆醇直接作用于hucMSCs，降低hucMSCs中IL-6和VEGF的分泌，特別是IL-6，同時(shí)也降低了IL-6和VEGF mRNA水平的表達(dá)，增強(qiáng)PDGFR-β1的表達(dá)，但對(duì)PDGF-D和TGFβ1沒有明顯的影響。RES-hucMSCs-CM中IL-6的表達(dá)

4、水平降低，RES-hucMSCs-CM對(duì)腫瘤細(xì)胞A549和H446的形態(tài)、增殖和凋亡都沒有顯著的影響，但能明顯抑制A549和H446細(xì)胞的遷移。此外，Western blot的結(jié)果顯示RES-hucMSCs-CM處理A549細(xì)胞后其p-STAT3的表達(dá)水平下降。
　　結(jié)論:白藜蘆醇降低hucMSCs中IL-6和VEGF的分泌，增強(qiáng)PDGFR-β1的表達(dá)水平。白藜蘆醇預(yù)處理hucMSCs的條件培養(yǎng)基(RES-hucMSCs-CM)通