GVHD中內(nèi)皮細胞和組織因子的作用以及蘇木水提取物免疫調(diào)節(jié)作用的初步研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：內(nèi)皮細胞及TF在GVHD中作用的初步研究。
　　 【目的】體外混合培養(yǎng)人內(nèi)皮細胞與異體淋巴細胞后，檢測人內(nèi)皮細胞TF和IL-2的表達水平，以及使用免疫抑制劑后內(nèi)皮細胞TF及IL-2的變化，初步反映內(nèi)皮細胞損傷和TF異常表達在GVHD中的意義。
　　 【方法】體外混合人內(nèi)皮細胞與異體人淋巴細胞以及加入不同濃度的CsA共培養(yǎng)4～6小時后，用流式細胞技術(shù)和RT-PCR檢測內(nèi)皮細胞中T

2、F的表達水平，ELISA檢測上清中IL-2的水平。將陰性對照、陽性對照的結(jié)果相互比較，再將加入不同濃度CsA的培養(yǎng)體系中的結(jié)果分別與陰性對照、陽性對照進行比較。
　　 【結(jié)果】體外混合人內(nèi)皮細胞與異體人淋巴細胞共培養(yǎng)后，與未混合培養(yǎng)的相比內(nèi)皮細胞表達TF增加（P<0.01），并且培養(yǎng)液中IL-2水平也相應(yīng)增高（P<0.01），在加入不同濃度的CsA之后，發(fā)現(xiàn)與陽性對照相比TF mRNA表達下降，相應(yīng)的培養(yǎng)液中IL-2濃度也下降（

3、P<0.01）。
　　 【結(jié)論】內(nèi)皮細胞損傷與TF異常表達在骨髓移植后的GVHD中起關(guān)鍵的作用，其中受體的內(nèi)皮細胞受到供體淋巴細胞刺激后高表達TF可能是GVHD發(fā)生、進展過程中的關(guān)鍵步驟。
　　 第二部分：蘇木水提取物對GVHD中內(nèi)皮細胞及TF作用的初步研究。
　　 【目的】體外混合培養(yǎng)人內(nèi)皮細胞與異體淋巴細胞，同時加入不同濃度的CsA和蘇木水提取物，檢測人內(nèi)皮細胞TF和IL-2的表達水平，初步反映蘇木對于GVH

4、D中內(nèi)皮細胞損傷、TF和細胞因子異常表達的調(diào)節(jié)作用，并通過與CsA作用結(jié)果之間的比較來探討治療GVHD時用蘇木替代或者部分替代CsA的可能性。
　　 【方法】體外混合人內(nèi)皮細胞與異體人淋巴細胞，同時加入不同濃度的CsA和蘇木水提取物共培養(yǎng)4～6小時后，用RT-PCR檢測內(nèi)皮細胞中TF的表達水平，ELISA檢測上清中IL-2的水平，與陽性對照、陰性對照相比較。并且將蘇木組與CsA組相互比較最終的結(jié)果。
　　 【結(jié)果】體外混

5、合人內(nèi)皮細胞與異體人淋巴細胞，同時加入不同濃度的CsA和蘇木水提取物共培養(yǎng)4～6小時后，與未混合培養(yǎng)組相比內(nèi)皮細胞TF表達均增加，并且培養(yǎng)液中IL-2水平也相應(yīng)增高（P<0.01）。與陽性對照相比內(nèi)皮細胞TF mRNA的表達隨著蘇木水提取物濃度和CsA濃度的增加有明顯的下降趨勢，IL-2也呈同樣的趨勢（P<0.01）。而蘇木在部分濃度上的免疫抑制作用與CsA無顯著性差異。
　　 【結(jié)論】內(nèi)皮細胞損傷與TF異常表達在骨髓移植后的G