無創(chuàng)定量超聲積分與肝纖維化程度關系的實驗及臨床研究.pdf

1、肝穿刺活體病理組織學檢查是診斷慢性肝病肝纖維化、肝硬化的金標準，但目前常規(guī)實施肝穿刺活體組織病理學檢查尚有相當難度，超聲診斷技術作為一種簡便快捷的無創(chuàng)性檢查手段，如能在慢性肝病肝纖維化階段的診斷中發(fā)揮作用，對于臨床治療及逆轉肝纖維化的療效觀察將具有積極的幫助。 目的: (1)本研究通過制作實驗性肝纖維化動物模型并搜集臨床肝纖維化患者，應用多指標超聲觀察，進行半定量分析并計算每個實驗鼠及肝纖維化患者每次超聲積分，探討肝纖維

2、化的超聲定量診斷作用。 (2)計算不同階段纖維化的肝循環(huán)指數(shù)(HCI)及A/P，評估肝儲備功能。 (3)分別進行肝纖維化血清學指標檢查及外周血清常規(guī)生化肝功能檢查。 (4)在超聲引導下，對肝纖維化模型鼠及患者進行肝組織組織病理學活檢。肝纖維化的病理診斷標準采用2000年西安會議標準。 (5)每份動物實驗標本采用免疫組化方法檢測細胞增殖相關因子細胞增殖核抗原PCNA及癌基因C-erbB-2的表達。

3、材料與方法: (1)肝纖維化模型制作：健康清潔級雄性SD大鼠(購自第四軍醫(yī)大學實驗動物中心)35只，體質量150--220g，平均180g，隨機分五組，一組為對照組(S0)，其余四組采用復合因子致肝纖維化模型方法，建立鼠肝纖維化模型。 (2)對肝纖維化動物模型及肝纖維化患者進行分別進行二維超聲及彩色多普勒血流動力學檢查，結果以磁光盤保存，脫機分析，對不同時期肝纖維化模型及肝纖維化患者進行超聲積分及半定量分析。 (

4、3)通過彩色多普勒血流動力學檢測，計算肝循環(huán)指數(shù)(HCI)及A/P。 (4)檢測對照組和各實驗組外周血清纖維化指標水平和外周血清常規(guī)生化肝功能(總膽紅素、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、血清白蛋白、血清球蛋白)。 (5)對實驗鼠肝組織進行免疫組織化學染色，觀察肝組織內細胞增殖相關因子細胞增殖核抗原PCNA及癌基因C-erbB-2的表達。 結果: (1)肝實質平均灰階值S0期與S1～4期間有顯著差異(P＜0.01)

5、，S1～4各組間有顯著差異(P＜0.01)。隨著纖維化程度加重，離散度S0期與S1-4期有顯著性差異，實驗組間比較S1～4期間有顯著性差異(P＜0.01)。超聲檢查結果與肝纖維化分期的相關性分析表明，超聲總積分與病理分期相關系數(shù)為0.860(P＜0.01)；如采用超聲總積分與血清肝纖維化指標聯(lián)合應用，可使早期肝硬化診斷靈敏性提高至96.5％，特異度提高至95.8％。 (2)隨著纖維化程度的加重HCI逐漸降低，A/P逐漸升高。

6、 (3)經比較發(fā)現(xiàn)，超聲、CTP、MELD積分與肝纖維化病理分期相關系數(shù)為0.860，0.815，0.824，超聲、CTP、MELD積分診斷肝纖維化敏感度分別為94.5％，94.2％，93.9％，其特異度分別為93.4％，92.9％，93.8％。 (4)隨著纖維化程度加重，肝纖維化實驗鼠及患者的血清肝纖維化指標和生化指標總膽紅素(TB)、白蛋白(ALB)、谷丙轉氨酶(ALT)變化漸趨明顯。 (5)免疫組化染色結果表明

7、，對照組肝細胞核細胞增殖核抗原PCNA呈陰性表達，實驗組各期肝細胞核不同程度PCNA陽性表達；對照組肝細胞膜癌基因C-erbB-2陰性表達，實驗組各期肝細胞膜不同程度細胞C-erbB-2陽性表達，兩者表達率在S1-4期均有顯著性差異。 結論: (1)計算機輔助超聲圖像半定量分析，可對不同階段肝纖維化進行量化。超聲總積分與病理分期相關性較好，相關系數(shù)為0.860;采用超聲總積分與血清肝纖維化指標聯(lián)合應用，可使肝硬化診斷靈敏

8、度提高至96.5％，特異度提高至95.8％。超聲、CTP、MELD積分三種方法結合使用，診斷肝纖維化敏感度可提高至96.7％，特異度可提高至95.5％。 (2)HCI及A/P可反映肝纖維化時肝臟儲備功能。 (3)隨著纖維化程度加重，肝纖維化實驗鼠和患者的血清肝纖維化指標及血清生化指標改變漸趨明顯。 (4)免疫組化染色顯示，肝纖維化患者肝細胞核PCNA及肝細胞膜C-erbB-2不同程度陽性表達，表明在肝纖維化基礎上