多效生長因子、青娥丸加減對去卵巢骨質疏松大鼠治療療效的研究.pdf

1、文章內容分為兩部分進行闡述
　　第一部分 多效生長因子對去卵巢骨質疏松大鼠治療療效的研究
　　目的:近期研究表明多效生長因子（pleiotrophin，PTN）基因屬于動力敏感性基因，機械應力在其表達中起著非常關鍵性的作用，其活性產物PTN參與了骨細胞對機械應力的應答，對骨小梁構像有可能起重要的作用。本實驗建立大鼠骨質疏松模型，通過骨密度、骨組織形態(tài)學參數(shù)、骨小梁三維重建結構等指標，初步評價80μg/Kg/d PTN對骨質疏

2、松癥的治療療效。
　　方法:
　　(1)雌性SPF級4月齡SD大鼠12只，適應性飼養(yǎng)1周后隨機分為以下4組:Ⅰ.假手術+氯化鈉組（SHAM組），Ⅱ.雙側卵巢切除+氯化鈉組（OVX組），Ⅲ.雙側卵巢切除+甲狀旁腺激素組（PTH組），Ⅳ.雙側卵巢切除+PTN組（PTN組），每組3只。水合氯醛0.3ml/Kg皮下注射麻醉，Ⅰ組切除與卵巢體積同樣大小的脂肪組織，其余各組切除雙側卵巢。
　　(2)各組于造模術后10周起，分別給予

3、以下處理:SHAM組和OVX組每日給予皮下注射PBS0.2ml/d， PTH組每日給予皮下注射PTH20μ g/Kg，PTN組每日給予皮下注射PTN80μg/Kg。
　　(3)術后21周處死大鼠。
　　(4)分離子宮，稱重。分離股骨，剝離軟組織。對股骨干骺端進行顯微CT掃描，得到骨小梁三維重建圖像和以下參數(shù):骨密度(BMD)、骨小梁體積(BV)、骨小梁表面(BS)、全部骨組織體積(TV)、骨體積分數(shù)(BV/TV)、骨表面積和

4、骨體積的比值(BS/BV)、骨表面積和組織體積的比值(BS/TV)、骨小梁數(shù)量(Tb.N)、骨小梁分離度(Tb.Sp)、骨小梁厚度(Tb.Th)、各向異性(DA)、結構模型指數(shù)(SMI)、骨小梁模式因子(TBPf)。
　　結果:
　　(1)每組大鼠術前體重組間無顯著性差異(P＞0.05)。卵巢切除術后10周，SHAM組體重顯著低于其他各組(P＜0.05)。術后21周，SHAM組體重顯著低于其他各組(P＜0.05)，子宮重和子

5、宮重/體重顯著高于其他各組(P＜0.05)。
　　(2) SHAM組BMD、 BV/TV顯著高于OVX組（P＜0.01）。SHAM組TB.N、Tb.Th顯著高于OVX組(P＜0.01，P＜0.05)，Tb.Sp、SMI、TBPf顯著低于OVX組(P＜0.01)，DA低于OVX組，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　(3) OVX組BMD、BV/TV顯著低于PTN組、PTH組(P＜0.01，P＜0.05)。OVX組TB.N

6、顯著低于PTN組、PTH組(P＜0.01)，Tb.Sp、TBPf顯著高于PTN組(P＜0.05)和PTH組(P＜0.01)，DA高于PTN組、PTH組，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　(4) PTH組BMD、BV/TV顯著高于PTN組(P＜0.01)。PTH組TB.N、Tb.Th顯著高于PTN組(P＜0.01)，TBPf、SMI顯著低于PTN組(P＜0.01)，Tb.Sp、DA與PTN組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05

7、)。
　　(5)股骨骨小梁三維重建圖像顯示，SHAM組骨小梁排列整齊且緊密，骨小梁數(shù)量多。其他各組骨小梁數(shù)量減少，排列稀疏，間隙增大，某些部位出現(xiàn)骨小梁斷裂，但PTH組和PTN組骨小梁結構的緊密性遠遠優(yōu)于OVX組。
　　結論:皮下注射PTN[80μg/(kg.d)]可有效增加去卵巢大鼠的骨量，改善骨小梁微結構。
　　第二部分 青娥丸加減對去卵巢骨質疏松大鼠治療療效的研究
　　目的:青娥丸是治療骨質疏松癥的經典方劑

8、。本實驗建立大鼠骨質疏松模型，通過骨密度、骨組織形態(tài)學參數(shù)、骨小梁三維重建結構等指標，評價由杜仲、續(xù)斷、川牛膝、補骨脂、龍骨、當歸和胡桃肉七味中藥組成的青娥丸加減方劑對骨質疏松癥的治療療效。
　　方法:
　　(1)雌性SPF級4月齡SD大鼠12只，適應性飼養(yǎng)1周后隨機分為以下4組:Ⅰ.假手術+氯化鈉組（SHAM組），Ⅱ.雙側卵巢切除+氯化鈉組（OVX組），Ⅲ.雙側卵巢切除+甲狀旁腺激素組（PTH組），Ⅳ.雙側卵巢切除+青娥丸

9、加減組（中藥組），每組3只。水合氯醛0.3ml/Kg皮下注射麻醉，Ⅰ組切除與卵巢體積同樣大小的脂肪組織，其余各組切除雙側卵巢。
　　(2)各組于造模術后10周起，分別給予以下處理:SHAM組和OVX組每日給予皮下注射PBS0.2ml/d，PTH組每日給予皮下注射PTH20μg/Kg，中藥組每日給予中藥藥劑0.9mg/Kg灌胃。
　　(3)術后21周處死大鼠。參照第一部分方法進行分析。
　　結果:
　　(1)各組大

10、鼠術前體重組間無顯著性差異(P＞0.05)。卵巢切除術后10周，SHAM組體重顯著低于其他各組(P＜0.05)。術后21周，SHAM組體重顯著低于其他各組（P＜0.05），子宮重和子宮重/體重顯著高于其他各組(P＜0.05)。
　　(2)SHAM組BMD、 BV/TV顯著高于OVX組（P＜0.01）。SHAM組TB.N、Tb.Th顯著高于OVX組(P＜0.01，P＜0.05)，Tb.Sp、SMI、TBPf顯著低于OVX組（P＜0.

11、01），DA低于OVX組，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　(3)OVX組BMD、BV/TV顯著低于中藥組(P＜0.01，P＜0.05)。OVX組TB.N顯著低于中藥組(P＜0.01)，Tb.Sp、TBPf、 SMI顯著高于OVX組(P＜0.01，P＜0.05)，DA、Tb.Th低于中藥組，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　(4)PTH組BMD顯著高于中藥組(P＜0.05)，BV/TV高于中藥組，差異無統(tǒng)計學意義

12、。PTH組Tb.Th顯著高于中藥組(P＜0.01)，SMI、TBPf顯著低于中藥組（P＜0.05，P＜0.01），TB.N高于中藥組，DA和Tb.Sp低于中藥組，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　(5)股骨骨小梁三維重建圖像顯示，SHAM組骨小梁排列整齊且緊密，骨小梁數(shù)量多。其他各組骨小梁數(shù)量減少，排列稀疏，間隙增大，某些部位出現(xiàn)骨小梁斷裂，但治療組骨小梁結構的緊密性遠遠優(yōu)于OVX組。
　　結論:青蛾丸加減方劑有效增加