蝦青素合成酶基因轉(zhuǎn)化花生的研究.pdf

1、蝦青素是一種具有極強(qiáng)抗氧化活性的類胡蘿卜素，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。紅球藻中蝦青素的合成是在一系列酶的作用下合成的，其中β-胡蘿卜素酮化酶(CrtW)和β-胡蘿卜素羥化酶(CrtZ)是合成過(guò)程的兩個(gè)關(guān)鍵酶。本試驗(yàn)以花育21號(hào)、22號(hào)、23號(hào)、24號(hào)子葉為外植體，用含有載體pCAMBIA1301的農(nóng)桿菌EHA105侵染轉(zhuǎn)化。通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)化植株的PCR擴(kuò)增驗(yàn)證，β-胡蘿卜素酮化酶(CrtW)基因和β-胡蘿卜素羥化酶(CrtZ)基因轉(zhuǎn)入花生基因組。實(shí)

2、驗(yàn)中對(duì)影響花生再生體系和轉(zhuǎn)化體系的因素進(jìn)行了優(yōu)化，主要內(nèi)容如下： 1．高頻再生體系的建立一直是花生轉(zhuǎn)基因的主要影響因素，而基因型又是影響花生再生的主要因素。本試驗(yàn)以花育21、22、23、24為實(shí)驗(yàn)材料，以子葉為外植體誘導(dǎo)叢生芽，建立了適應(yīng)多基因型的高頻再生體系。在6-BA為20uM、2，4～D為7.5uM的條件下花生子葉叢生芽平均再生率為90.67％。 2．抗生素對(duì)花生再生體系有顯著影響，通過(guò)本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，頭孢霉素使用