系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血單個(gè)核細(xì)胞IL-28RA基因mRNA表達(dá)研究.pdf

1、研究背景：系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種多發(fā)生于青年女性，可累及多器官、多系統(tǒng)，以自身抗體產(chǎn)生和免疫復(fù)合物沉積為病理特征的自身免疫性結(jié)締組織疾病。SLE發(fā)病機(jī)制到現(xiàn)在尚未完全明確，大量研究顯示，遺傳、內(nèi)分泌、感染、免疫異常和一些環(huán)境因素與本病的發(fā)生有關(guān)，其中，遺傳因素在SLE的發(fā)病中起到重要作用。
　　過(guò)去二十多年，許多研究小組利用遺傳連鎖和關(guān)聯(lián)研究，發(fā)現(xiàn)了大量SLE的易感基因，如HLA，STAT4，IRF5，ITGAM和PTPN

2、22等。隨著Human Haplotype Map(HapMap）的完成以及高效廉價(jià)的高通量基因分型實(shí)驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用，2008年以來(lái)，利用全基因組關(guān)聯(lián)分析（Genome-wide association study，GWAS）在對(duì)不同種族人的SLE患者進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)了40多個(gè)易感基因/位點(diǎn)。其中，2013年，李揚(yáng)等以GWAS數(shù)據(jù)庫(kù)（7260個(gè)銀屑病病例和9842個(gè)對(duì)照以及2207個(gè)SLE病例和9842個(gè)對(duì)照)為基礎(chǔ)，通過(guò)GWAS分析，發(fā)現(xiàn)

3、了銀屑病與SLE共同的易感基因位點(diǎn)(NFKBIA和IL-28RA)，其中，IL-28RA（全稱(chēng)為Interleukin-28 receptor，alpha，又名IFNLR1；LCR2；CRF2/12；IL-28R1）基因的單個(gè)核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）rs4649203與SLE易感性顯著相關(guān)（P=9.90×10-09）。IL-28RA基因編碼的蛋白屬于II型細(xì)胞因子受體家族，此蛋

4、白同IL-10受體β（Interleukin-10 receptor，beta，IL-10RB）組成一個(gè)受體復(fù)合物，此受體復(fù)合物與III型IFN的3個(gè)細(xì)胞因子（IL-28A、IL-28B、IL-29）相互作用，細(xì)胞高表達(dá)此受體復(fù)合體后導(dǎo)致細(xì)胞對(duì)于 IL-28A、IL-29的反應(yīng)增強(qiáng)，而對(duì)于 IL-28B的反應(yīng)減弱，通過(guò)刺激JAK-STAT信號(hào)通路，從而在細(xì)胞的增殖、分化、凋亡以及免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)過(guò)程發(fā)揮作用。IL-28RA基因與銀屑

5、病、SLE、慢性丙型肝炎、多發(fā)性硬化癥、過(guò)敏性鼻炎等疾病有關(guān)。本研究通過(guò)運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，測(cè)定IL-28RA基因的mRNA在SLE患者以及正常對(duì)照中的表達(dá)情況，來(lái)探討IL-28RA基因在SLE發(fā)病中的作用及其可能作用機(jī)制。
　　目的：探討 SLE患者與健康對(duì)照的外周血學(xué)單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）中IL-28RA基因mRNA表達(dá)情況及差異，了解IL-28RA基因mRNA表達(dá)與SLE活動(dòng)度指數(shù)（SLEDAI）及易感位點(diǎn)SNP

6、rs4649203的相關(guān)性。
　　方法：收集SLE患者62例，正常對(duì)照69例，從外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）中提取出mRNA，然后逆轉(zhuǎn)錄為complementary DNA（cDNA），加入相應(yīng)的熒光染料、引物，利用ABI7900HT高通量熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞中IL-28RA基因mRNA的表達(dá)情況；從研究對(duì)象外周血提取DNA，濃度標(biāo)準(zhǔn)化后，經(jīng)Sequenom MassArray技術(shù)對(duì)所有研究對(duì)象DNA樣本進(jìn)行S

7、NP rs4649203位點(diǎn)的基因分型；收集整理所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，用SPSS20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：SLE患者IL-28RA基因 mRNA表達(dá)水平高于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；IL-28RA基因mRNA表達(dá)水平與SLEDAI無(wú)相關(guān)性（r=0.045，P=0.726）；IL-28RA基因mRNA表達(dá)水平與SNP rs4649203無(wú)相關(guān)性（P>0.05）。
　　結(jié)論：IL-28RA基因表達(dá)