田七注射液對阿霉素腎纖維化大鼠SnoN-TGF-β1-Smads信號通路通路的影響.pdf

1、目的:觀察田七注射液對阿霉素(ADR)腎纖維化大鼠腎臟Smad轉錄共抑制因子(SnoN)、轉化生長因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad6蛋白表達的影響，探討田七注射液抗腎纖維化的作用機制。
　　 方法:清潔級SD雄性大鼠80只，隨機分為4組:正常組(n=20)，對照組(n=20)，模型組(n=20)，田七注射液治療組（以下簡稱田七組）(n=20)。通過切除大鼠右腎，術后第7天及第30天分別尾靜脈注射ADR5mg/kg

2、、3mg/kg建立ADR腎纖維化大鼠模型，對照組僅切除右腎，不注射ADR，予生理鹽水(1.5ml/100g·d)腹腔注射;模型組造模后予生理鹽水(1.5ml/100g·d)腹腔注射;田七組造模后予田七注射液(1.5ml/100g·d)腹腔注射給藥;正常組不予任何處理。每周測大鼠體重，隔周收集大鼠24h尿量，測24h尿蛋白定量。連續(xù)給藥56天后處死大鼠，處死前收集腹主動脈血和腎組織標本。全自動生化分析儀檢測大鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐

3、(Scr)，觀察腎功能變化。取各組大鼠腎組織行蘇木素伊紅染色(HE)和馬松染色(Masson)，光鏡下觀察腎臟病理變化;免疫組化檢測腎組織中SnoN、TGF-β1、Smad3、Smad6蛋白的表達，Westernblot檢測SnoN蛋白的表達水平。
　　 結果:
　　 (1)各組大鼠一般情況:與正常組和對照組大鼠相比，模型組大鼠活力明顯減退，精神萎靡，體重下降，攝食和飲水量減少，蜷縮成團，脫毛明顯，并出現腹水等癥狀，田七

4、組大鼠上述情況較模型組明顯改善。
　　 (2)各組大鼠24小時尿蛋白定量結果:模型組尿蛋白排泄量顯著高于正常組(P＜0.01);與模型組相比，田七組尿蛋白排泄量均明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　 (3)各組大鼠生化檢測結果:模型組大鼠的BUN、Scr均顯著高于正常組(P＜0.01);與模型組相比，田七組BUN、Scr有所降低（P＜0.05）。
　　 (4)各組大鼠腎臟外觀及病理結果:正常組和對照

5、組大鼠腎臟外觀正常，光鏡下可見正常結構腎小球和腎小管，與正常組相比，模型組大鼠腎臟腫大，顏色蒼白，質地變硬。腎臟剖面，模型組的腎臟整體呈缺血狀，以腎皮質為重，顏色暗紅，質地粗糙變硬，部分有囊腫和瘢痕形成。光鏡下腎小球系膜細胞增生，腎小球系膜區(qū)增寬，球囊壁黏連;部分腎小球有新月體形成，出現局灶硬化;病變腎小球周圍的近曲小管上皮細胞腫脹，腎小管萎縮，腎小管腔內可見蛋白管型;腎間質炎性細胞浸潤，腎間質纖維化;。而田七組的腎臟病理改變明顯輕于模

6、型組;與模型組比較，田七組腎小球硬化指數及腎間質損傷分數明顯降低（P＜0.01）。
　　 (5)各組大鼠腎組織免疫組化檢測結果:與正常組比較，模型組SnoN蛋白表達顯著下調（P＜0.01），TGF-β1、Smad3蛋白表達顯著上調（P＜0.01），Smad6蛋白表達顯著下調（P＜0.01）;與模型組比較，田七組腎組織SnoN蛋白表達顯著上調(P＜0.01)，TGF-β1、Smad3蛋白表達顯著下調（P＜0.01），Smad6蛋白

7、表達顯著上調（P＜0.01）。
　　 (6)各組大鼠腎組織Westernblot檢測結果:與正常組比較，模型組腎組織SnoN蛋白表達顯著減少（P＜0.01）;與模型組比較，田七組腎組織SnoN蛋白表達明顯增加（P＜0.01）。
　　 結論:
　　 (1)田七注射液可以降低ADR腎纖維化大鼠BUN、Scr水平，減少尿蛋白，改善腎臟病理損傷，對腎臟有保護作用
　　 (2)田七注射液可能是通過上調SnoN、Sm