田七注射液對阿霉素腎纖維化大鼠的CTGF-TGF-β1-Smads信號通路的影響.pdf

1、目的：觀察田七注射液對阿霉素(Adriamycin，ADR)腎病大鼠腎臟結(jié)締組織生長因子(Connective tissue growth factor，CTGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(Transforming growth factor-β1，TGF-β1)、Smads蛋白表達的影響，探討田七注射液對ADR大鼠腎臟纖維化的作用機制。
　　方法：將清潔級（Sprasue-Dawley）SD雄性大鼠60只，隨機分為三組：對照組，模型

2、組，田七注射液治療組（以下簡稱田七組），每組20只。三組均行右腎切除術(shù)，對照組術(shù)后不注射ADR，予生理鹽水（10ml/kg〃d）腹腔注射；模型組于術(shù)后第7天及術(shù)后第30天分別尾靜脈注射ADR5mg/kg、3mg/kg建立阿霉素腎纖維化大鼠模型，造模后予生理鹽水（10ml/kg〃d）腹腔注射；田七組按上法造模后，予田七注射液（2g/kg〃d）腹腔注射給藥，連續(xù)給藥8周后，與其他兩組同時處死。處死前收集腹主動脈血和腎臟組織標本。觀察各組大鼠

3、治療前后的體重及一般狀況；在給予田七注射液的第2、第4、第6和第8周后分別于各組設(shè)臵代謝籠，留取24小時尿液。采用磺柳酸-硫酸鈉比濁法檢測24小時尿蛋白定量；采用全自動化儀檢測血尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）、血肌酐（Serum creatinine，Scr）含量；將腎組織病理切片進行HE、六胺銀染色、Masson染色，光鏡下觀察腎臟病理改變；采用免疫組化法檢測腎組織中CTGF、TGF-β1、Smad3、Sma

4、d7蛋白表達水平。
　　結(jié)果：①一般情況：與對照組大鼠相比，模型組大鼠活力明顯減退、體重下降、眼球顏色由淡紅轉(zhuǎn)為暗紅，舌質(zhì)絳紫、尾部有瘀斑，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。田七組大鼠活動度、靈敏度略優(yōu)于模型組，眼球顏色轉(zhuǎn)為淡紅，舌質(zhì)瘀紫、尾部瘀斑程度均有所改善，且體重下降速度較模型組慢。②24h尿蛋白定量結(jié)果：模型組及田七組腎纖維化大鼠24h尿蛋白定量較對照組均明顯升高（P<0.01）；與模型組比較，田七組24h尿蛋白定量明顯

5、減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。③生化檢測結(jié)果：田七組和模型組大鼠的BUN、Scr均顯著高于對照組（P<0.01）；與模型組相比，田七組 BUN、Scr有所降低（P<0.05）。④腎臟病理切片顯示：與對照組相比，模型組的腎臟腫大，顏色變淺，有囊性感。腎臟剖面，模型組的腎臟實質(zhì)明顯變薄，呈囊狀，顏色暗紅，表面粗糙不平，有囊腫和瘢痕。缺血狀，以腎皮質(zhì)為重，光鏡下腎小管上皮細胞扁平，細胞崩解、脫落，伴細胞再生；腎小管基膜增厚，管腔擴張

6、，內(nèi)可見細胞的崩解碎屑；腎間質(zhì)可見淋巴-單核細胞浸潤，伴細胞外基質(zhì)（Extracellular matrix，ECM）沉積；部分腎小球有新月體形成，部分腎小球出現(xiàn)局灶硬化；而田七組的腎臟病理改變明顯輕于模型組；與模型組比較，田七組腎小球硬化指數(shù)及腎間質(zhì)損傷分數(shù)明顯下降（P＜0.01）。⑤各組大鼠免疫組化法檢測結(jié)果：與對照組比較，模型組CTGF、TGF-β1、Smad3表達顯著上調(diào)（P<0.01），Smad7表達顯著下調(diào)（P<0.01）；