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1、分類號:R7357密級:學(xué)位類別:科學(xué)學(xué)位囤專業(yè)學(xué)位口,o學(xué)校代碼:10062學(xué)號:2011601134學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)又坪魯斜矢量博士學(xué)位論文DoCToRAI,DISSERTATIoN論文題目:Treg/Thl7在HBV感染的肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用TITLETheroleofregulatoryTcellsandThelper17cellsinthedevelopmentofHCCwithHBVinfection一級學(xué)科:中西醫(yī)結(jié)合二級學(xué)
2、科:中西醫(yī)結(jié)合臨床肝膽外科論文作者:黃勇指導(dǎo)教師:杜智教授導(dǎo)師組成員:王鳳梅朱爭艷高英堂天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二零一四年五月天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要持續(xù)的HBV(hepatitisBviruses)感染所引起的慢性炎癥損傷使肝細(xì)胞反復(fù)壞死和再生,從而啟動肝細(xì)胞再生結(jié)節(jié)至不典型增生以至肝癌的發(fā)生過程。因此,HBV的感染所引起的炎癥免疫反應(yīng)是導(dǎo)致肝癌發(fā)生的關(guān)鍵所在。而淋巴細(xì)胞是機體免疫反應(yīng)的主體,新近發(fā)現(xiàn)的具免疫抑制作用的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞
3、(regulatoryTcells,Treg)和具促炎作用的T輔助細(xì)胞17(Thelpercell17,Thl7)起著控制機體免疫平衡的作用。多個研究表明,Treg和Thl7細(xì)胞平衡的打破參與多種人類腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。對于肝癌,有分別獨立對Treg和Thl7的研究顯示,兩者均與肝癌的進展和患者預(yù)后相關(guān)。但是,到目前為止,Treg和rnll7兩者失衡在肝炎肝癌轉(zhuǎn)化以及肝癌發(fā)生和發(fā)展中的作用尚未見文獻報道。因此,本文旨在深入探討抗炎的Tre
4、g和促炎的11117在具有HBV感染背景的肝癌發(fā)生和發(fā)展過程中的作用,并闡述其可能的機制。目的1明確慢乙肝進展為肝癌隊列肝組織及外周血中Treg和Thl7細(xì)胞以及血漿中相關(guān)因子IL10和IL17的表達(dá)情況,探討兩者平衡在有HBV感染背景的肝癌發(fā)生和發(fā)展中的作用。2體外模擬具有HBV感染背景的肝癌微環(huán)境,進一步探討Treg和Thl7細(xì)胞的功能,以揭示兩者在肝癌發(fā)展中可能的機制。3采用循證醫(yī)學(xué)的研究方法探討和驗證腫瘤浸潤的FoxP3Treg
5、與肝癌患者預(yù)后的關(guān)系。方法1以慢性肝炎進展為肝癌隊列為研究模型,病理連續(xù)切片免疫組化檢測46例慢乙肝、37例不典型增生、53例肝癌肝穿標(biāo)本以及56例成對肝癌與癌旁手術(shù)標(biāo)本中FoxP3Treg及IL17T的表達(dá)情況以及對肝癌患者預(yù)后的影響。2通過ELISA檢測上述隊列同時期血漿中IL10及IL17的表達(dá)情況以及與肝癌患者預(yù)后的影響。3通過流式細(xì)胞術(shù)檢測20例慢乙肝、19例肝硬化和52例肝癌肝及20健康對照者外周血中Treg和n117表達(dá)情
6、況。4磁珠分選Treg、Thl7及CD8T細(xì)胞,體外與HepG2及整合HBV全基因組的HepG2215細(xì)胞共培養(yǎng),通過MTT和ELISpot檢測Treg及Thl7對肝癌特異性CTL殺傷作用的影響。5采用BrdU/DAPI熒光雙染、MTT定性定量檢測Thl7細(xì)胞對肝癌細(xì)胞增殖的影響,并用ELISA檢測培養(yǎng)體系中VEGF、IL6和TGF13表達(dá)。6檢索PubMed,Embase,Cochrane,OvidMedline及萬方中文數(shù)據(jù)庫中研究
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