TDZd-8對小鼠急性胰腺炎治療作用的研究.pdf

1、目的:本實驗通過腹腔注射雨蛙素（1次/小時×13小時）制作BALB/c小鼠急性胰腺炎模型，腹腔給予TDZD-8(4-芐基-2-甲基-1，2，4-噻二唑烷-3，5-二酮)，通過比較治療組與模型組小鼠血淀粉酶(Amylase)、白介素-6(IL-6)水平，免疫組化法分析小鼠核因子表達，HE染色法觀察比較不同組間小鼠胰腺病理損傷程度，參照Schmidt's方法進行胰腺病理評分，探討TDZD-8對小鼠急性胰腺炎模型的治療作用及機制。
　　

2、 方法:隨機選取健康雄性清潔級BALB/c小鼠54只，體重20±2g，河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供，將以上小鼠隨機分為對照組（C組），急性胰腺炎組（A組），TDZD-8治療組（T組），各實驗組根據(jù)3h，6h，12h不同時間點再分為3個亞組，每個亞組6只小鼠。急性胰腺炎模型制作采用腹腔注射雨蛙素（50μg/Kg體重），每小時注射一次，共注射13次。對照組腹腔注射等體積的生理鹽水，每小時注射一次，共注射13次。TDZD-8治療組在末次注射

3、雨蛙素后半小時，腹腔注射TDZD-8（10mg/kg體重，溶于10％DMSO中），A組、C組分別在相同時間點注射等體積的10％DMSO。各組小鼠在相應的時間點分別采用摘眼球取血法取血，用于檢測各組小鼠血液中血淀粉酶、IL-6水平，同時取小鼠胰腺組織，每個胰腺組織均分為兩部分，立即用10％福爾馬林溶液固定，其中一部分行HE染色，病理觀察，另一部分行免疫組化檢測NF-κB表達水平，實驗數(shù)據(jù)采用spss13.0軟件進行處理，兩組數(shù)據(jù)采用t檢驗

4、，血淀粉酶、血IL-6值多組數(shù)據(jù)比較采用方差分析SNK法，免疫組化評分與病理評分采用Kruskal-Wallis H檢驗及Mann-Whitney U檢驗，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、對照組血清淀粉酶水平各亞組內(nèi)無明顯差異，模型組、治療組內(nèi)各個亞組隨時間延長，血清淀粉酶均呈升高趨勢，其中模型組血淀粉酶水平從3小時組的3909.17±454.47U/L逐漸增加到5217.08±585.34

5、U/L，治療組血淀粉酶水平從3小時組的2644.87±307.86U/L逐漸增加到3872.84±350.31U/L。各個亞組間具有明顯差異(P＜0.05)。模型組與治療組各亞組血清淀粉酶水平較對照組均有明顯升高(P＜0.05)，而治療組各時間點血淀粉酶水平與相同時間點模型組的水平相比均有所降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 2、對照組各亞組內(nèi)IL-6水平無明顯差異，模型組與治療組各時間點血IL-6水平與對照組比較

6、有明顯升高趨勢，其中模型組血IL-6水平從3小時組的93.19±5.86U/L逐漸增加到144.42±19.49pg/ml，治療組血IL-6水平從3小時組的71.91±6.72pg/ml逐漸增加到109.45±11.39pg/ml，且各個亞組內(nèi)隨著時間點延長，IL-6水平呈逐漸升高趨勢，同時，治療組各亞組內(nèi)IL-6水平與同時間點模型組相比較，IL-6水平有所降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 3、免疫組化檢測顯示，

7、對照組中胰腺組織NF-κB少量表達，模型組NF-κB大量表達，治療組胰腺組織中NF-κB表達較對照組明顯增多，但與模型組相比，NF-κB表達有所減少(P＜0.05)。
　　 4、小鼠胰腺觀察:對照組胰腺未見充血、水腫及滲出;模型組小鼠胰腺可見充血、水腫，同時可見腹腔內(nèi)少量腹水;TDZD-8治療組小鼠胰腺輕度腫脹、充血，未見明顯腹水。
　　 5、胰腺組織病理學評分結(jié)果:對照組胰腺無水腫、出血、炎細胞浸潤及壞死，模型組胰腺小

8、葉間隙增寬，腺泡水腫，片狀壞死，實質(zhì)及間質(zhì)內(nèi)可見大量炎癥細胞浸潤;治療組胰腺可見炎癥細胞浸潤，但較A組有所減少，腺泡水腫，炎癥程度較A組減輕，治療組、模型組與對照組相比，病理評分具有顯著性差異(P＜0.05);模型組與治療組各亞組隨著時間點的延長，病理評分有增高趨勢，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、急性胰腺炎時核因子表達增多，炎性因子數(shù)量增加，進一步引起胰腺損傷。
　　 2、GSK3