我國(guó)布-加綜合征JAK2外顯子點(diǎn)突變的研究及病例信息分析.pdf

1、目的：通過(guò)分析徐州及周邊地區(qū)布-加綜合征(BCS)患者JAK2外顯子14中V617F點(diǎn)突變的發(fā)生率，在此基礎(chǔ)上測(cè)定JAK2外顯子12中547insL+I540-F47dup8、I540-N542delins、N542-E543del、E543-D544del、K539L、H538QK539L及F537-K539delinsL點(diǎn)突變的發(fā)生情況，為我國(guó)BCS的病因?qū)W研究提供新思路，為闡明BCS的發(fā)病機(jī)制和BCS的鑒別診斷及靶向治療提供新方向

2、。通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)合分析病例組病人一般資料和臨床資料，為針對(duì)BCS的診斷、治療、預(yù)后提供參考依據(jù)。
　　方法：本次研究采用實(shí)驗(yàn)室病因?qū)W研究、現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查、病案分析相結(jié)合的方法。收集2010年7月至2011年8月徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院介入科經(jīng)確診并住院的BCS患者120例作為病例組，同時(shí)篩選此期間徐醫(yī)附屬醫(yī)院體檢中心在年齡上與病例組相匹配的120例健康體檢者作為對(duì)照組。對(duì)病例組和對(duì)照組每個(gè)研究對(duì)象各抽取外周靜脈血2ml，從全血

3、中提取DNA，設(shè)計(jì)引物，應(yīng)用等位基因特異性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(AS-PCR)檢測(cè)每個(gè)研究對(duì)象JAK2V617F、547insL+I540-F47dup8、I540-N542delinS、N542-E543del、E543-D544del、K539LH538QK539L及F537-K539delinsL共八個(gè)位點(diǎn)的突變情況，對(duì)突變陽(yáng)性者進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR再次確定，并對(duì)所有陽(yáng)性樣本和隨機(jī)抽取的部分陰性樣本進(jìn)行DNA擴(kuò)增純化后測(cè)序驗(yàn)證。每確診一例

4、BCS的同時(shí)即對(duì)其進(jìn)行面對(duì)面的流行病學(xué)調(diào)查。跟蹤收集病例組和對(duì)照組完整的病歷資料和各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)。建立數(shù)據(jù)庫(kù)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：1.病例組資料特點(diǎn)：患者年齡主要集中于30-50歲之間，職業(yè)多為農(nóng)民，文化水平普遍偏低，經(jīng)濟(jì)狀況以貧困為主。本次研究的120例BCS患者中下腔靜脈型占42.5％(51/120)，混合型占40.0％(48/120)，肝靜脈型僅占17.5％(21/120)，符合中國(guó)BCS的病理類型分布特點(diǎn)。2.實(shí)

5、驗(yàn)室檢查指標(biāo)：病例組和對(duì)照組的血常規(guī)、生化檢測(cè)(肝功能項(xiàng)目)、癌抗原檢查的各項(xiàng)指標(biāo)經(jīng)比較均為P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.突變檢測(cè)結(jié)果：經(jīng)AS-PCR檢測(cè)出10例BCS患者存在JAK2V617F點(diǎn)突變，同時(shí)進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR和測(cè)序驗(yàn)證后結(jié)果一致，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)病例組與對(duì)照組差異有統(tǒng)汁學(xué)意義。JAK2外顯子12中K539L點(diǎn)存在5例突變，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)病例組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。JAK2外顯子12中其它6個(gè)位點(diǎn)在病例組和對(duì)照組中均未