基于CYP2C19分型的食管癌瘀毒內(nèi)結(jié)證個(gè)體化治療的研究.pdf

1、目的:臨床研究檢測食管癌瘀毒內(nèi)結(jié)證患者DNA中CYP2C19基因型，通過基因分型檢測結(jié)果，判定患者的藥物代謝速率類型，確定治療藥物冬凌草湯的用法及用量。實(shí)驗(yàn)研究通過觀察冬凌草甲素誘導(dǎo)體外人食管癌細(xì)胞9706凋亡的情況，并探討其機(jī)制。
　　方法:1、臨床研究:治療組30例患者，檢測CYP2C19酶，根據(jù)檢測結(jié)果分為快代謝類型，慢代謝類型，中代謝類型的病例。據(jù)此制定個(gè)體化治療方案。中代謝型的病例用冬凌草湯（由冬凌草30克，半邊蓮30克

2、，半枝蓮30克，蟾酥12克，水蛭12克，全蟲12克，昆布20克，蜈蚣12克，炙甘草10克組成），每日1劑，水煎至200ml，分2次口服。慢代謝型的病例用冬凌草湯，每2日1劑，水煎至200ml，每日口服100ml.快代謝型冬凌草湯中冬凌草用量增至60克。每日1劑，水煎至200ml，分2次口服。
　　2、實(shí)驗(yàn)研究:體外培養(yǎng)人食管癌9706細(xì)胞，用不同濃度冬凌草甲素處理細(xì)胞，用MTT法檢測冬凌草甲素對食管癌細(xì)胞株9706生長抑制作用;倒

3、置顯微鏡下觀察EC9706細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;采用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測冬凌草甲素對食管癌細(xì)胞株細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響，并計(jì)算出凋亡率;激光掃描共聚焦顯微鏡觀察不同濃度冬凌草甲素作用后EC9706細(xì)胞中Ca2+熒光強(qiáng)度的變化。免疫組化檢測Bcl-2、Bax凋亡基因表達(dá)水平。
　　結(jié)果:食管癌實(shí)體瘤療效，治療組完全緩解率為46.67％對照組為6.67％。兩組比較有極顯著性差異(p＜0.01)治療組部分緩解率為43.33％，對照組為30％.

4、兩組比較有顯著性差異(p＜0.05)。說明根據(jù)基因檢測結(jié)果進(jìn)行個(gè)體化治療用藥的治療組有效率較對照組高，副作用少，有顯著性差異。MTT法顯示冬凌草甲素作用人食管癌9706細(xì)胞株后，與空白對照組相比，抑制率隨時(shí)間增長和濃度增高而增高;不同濃度冬凌草甲素作用人食管癌9706細(xì)胞株后影響了其細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu);流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期結(jié)果顯示:冬凌草甲素作用于9706細(xì)胞48h、72h后與空白對照組比較均能使G1/G0期細(xì)胞顯著增多(P＜0.05)，G

5、1/G0期細(xì)胞數(shù)量隨作用時(shí)間增長和濃度升高而增加;細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示:冬凌草甲素作用于EC9706細(xì)胞株均能明顯誘導(dǎo)食管癌細(xì)胞凋亡(P＜0.05)，其作用為40μmol/L濃度組的作用效果最佳。與對照組相比，不同濃度冬凌草甲素均升高了EC9706細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度。有顯著性差異(P＜0.05)。隨著冬凌草甲素濃度增加，Bax表達(dá)逐漸增強(qiáng)，Bcl-2表達(dá)逐漸減弱。
　　結(jié)論:通過基因檢測制定食管癌瘀毒內(nèi)結(jié)證治療方案的治療組比對照組